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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
DEAE-Sephadex A-25
- 库存:
大量
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 规格:
25 g/盒
产品及特点:
颗粒大小:干粉40-120μm;最高流速: 4 7 5 c m / h ; 小蛋白以及巨大分子(MW:>20000);广泛用于蛋白质、多肽及生物碱的分离。
常温运输,-20℃保存,有效期一年。超敏可逆蛋白显色试剂 100ml
碱性磷酸酶底物显色试剂盒(BCIP/NBT) 100 ml
胞浆总蛋白提取试剂盒 50T
植物细胞质膜提取试剂盒 50T
植物蛋白提取试剂盒 50T
细菌总蛋白提取试剂盒 50T
DEAE葡聚糖凝胶 A-25-DEAE-Sephadex A-25酵母总蛋白提取试剂盒 50T
胞浆和核蛋白分步提取试剂盒 50T
膜蛋白提取试剂盒 50T
动物组织蛋白裂解液 50ml
真核细胞蛋白裂解液 50ml
RIPA裂解液 50ml
RIPA裂解液 100ml
包涵体溶解液 50ml
包涵体溶解液 100ml
蛋白复性液 50ml
蛋白复性液 100ml
蛋白标准(5mg/ml BSA) 1ml
PMSF(100mM) 1ml
5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 250ml
SDS-PAGE电泳液(10X) 100ml
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml
非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml
10%过硫酸铵 1.5ml
30% 丙烯酰胺 (29:1) 100ml
40% 丙烯酰胺 (39:1) 100ml
0.5M DTT 2ml
0.5M DTT 10ml
10% SDS 50ml
TEMED 5ml
1M Tris-HCl,pH6.8 50ml
1.5M Tris-HCl,pH8.8 100ml
Western转膜缓冲液 (20x) 100ml
Western一/二抗稀释液 100ml
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文献和实验1) 如果我用sephadex G-25脱盐,如何选择缓冲液?因为我认为,如果选择含盐的缓冲液,本身带入了盐,能起到脱盐的效果吗?如果选择含盐的缓冲液, 缓冲液里含有的盐会最后流出来吗? 另外,分子筛有没有载量的问题? 缓冲液选择看你需要什么缓冲液就选择什么,没有什么特别的要求.你的缓冲液当然是没有盐的,否则那何必除盐呢.含盐缓冲液当然不能去掉盐了,它只能把你样品中的盐去除,用的原理是蛋白在柱子中走得比
G-25 (Sephadex-G-25) 【 实验操作 】 1.实验凝胶的制备:商品凝胶是干燥的颗粒,使用时需经溶胀处理,称取4克葡聚糖凝胶G—25,加50毫升蒸馏水,搅拌均匀,在室温溶胀6小时,或沸水浴溶胀 2小时,一般采用后一种方法。再用倾泻法除去凝胶上层水及细小颗粒,用蒸馏水反复洗涤几次,再以缓冲溶液(pH7.0的Tris—醋酸溶液)洗涤2—3次,使pH和离子强度达到平衡,最后抽去溶液及凝胶颗粒内部气泡,凝胶可保存在缓冲液内。 2.装柱
一、原理deae-sephadex a-50(二乙氨基—乙基-葡萄糖凝胶a-50)为弱碱性阳离子交换剂。用NaOH将Cl-型转变为OH-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为pH6.85~7.5),其余均属酸性蛋白。pH7.2~7.4的环境中,酸性蛋白均被deae- sephadex a-50吸附,只有γ球蛋白不被吸附。因此,通过柱层析,γ球蛋白便可在洗脱中先流出,而其他蛋白则被吸附在柱上,从而便可分离获得纯化的IgG。1、试剂(1)盐析提取的人γ球蛋白(2)0.5N
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