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- F *, IF, IP, WB
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体名：
CD107b antibody | AC17
- 抗体英文名：
MOUSE ANTI DOG CD107b
- 浓度：
IgG concentration 1.0 mg/ml
- 应用范围：
F *, IF, IP, WB
- 宿主：
Mouse
- 适应物种：
Dog
- 保质期：
自发货之日起 12 个月
- 目录编号：
AC17
- 供应商：
伯乐生命医学产品（上海）有限公司
- 标记物：
Purified
- 克隆性：
Monoclonal Antibody
- 形态：
Purified IgG - liquid
- 亚型：
IgG1
- 免疫原：
MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells
- 规格：
0.1 mg
小鼠抗犬 CD107b 抗体（克隆号 AC17）是一款特异性识别犬 CD107b（溶酶体相关膜蛋白 2，LAMP-2）的单克隆抗体。该抗体适用于免疫荧光、免疫沉淀、Western Blot 和流式细胞术等多种实验。产品能有效识别分子量约 95 kDa 的糖基化蛋白，核心蛋白约 40 kDa，可用于研究 CD107b 在溶酶体定位、自噬途径及细胞膜相关功能中的作用。
小鼠抗犬 CD107b 抗体，克隆号 AC17 可识别犬 CD107b，也称为溶酶体相关膜蛋白 2 或 LAMP-2。使用小鼠抗犬 CD107b 抗体（克隆号 AC17）对 MDCK 细胞进行免疫荧光染色，显示的染色模式与溶酶体定位一致。这得到了共定位染色的支持：将外源性溶酶体糖蛋白禽类 LEP100 转染到 MDCK 细胞中，并使用抗 LEP100 抗体克隆 CV24 进行检测（Nabi 等人，1991）。
小鼠抗犬 CD107b 抗体（克隆号 AC17）在 MDCK 细胞中免疫沉淀出约 95 kDa 的蛋白质，经 Endo F 消化去除 N-连接寡糖后，产生 40 kDa 的核心蛋白产物，表明 CD107b 具有高度糖基化的特性。犬 CD107b 的分子量是许多溶酶体相关膜蛋白的典型分子量。在体外贴壁的 MDCK 细胞中，大部分（97%）CD107b 存在于溶酶体环境中，一小部分与细胞膜相关（Nabi 等人，1991）。
已证明 CD107b 与人、小鼠和大鼠的 CD107b 在 N 端氨基酸序列上具有高度同源性（Nabi 等人，1993）。
用 beta1-6-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶 V 转染貂 II 型肺上皮细胞系，显示形成了大的溶酶体空泡，称为多层体（MLBs），具有非常独特的 表型 并表达 CD107b，如克隆 AC17 的免疫荧光染色所示。这些多层体的形成需要通过自噬途径进行溶酶体降解，这可能与溶酶体贮积症有关（Hariri 等人，2000）。CD107b 参与细胞质蛋白的溶酶体摄取和内吞途径。
小鼠抗犬 CD107b 抗体（克隆号 AC17）适用于电子显微镜（Nabi 等人，1991）。
小鼠抗犬 CD107b 抗体（克隆号 AC17）在 MDCK 细胞中免疫沉淀出约 95 kDa 的蛋白质，经 Endo F 消化去除 N-连接寡糖后，产生 40 kDa 的核心蛋白产物，表明 CD107b 具有高度糖基化的特性。犬 CD107b 的分子量是许多溶酶体相关膜蛋白的典型分子量。在体外贴壁的 MDCK 细胞中，大部分（97%）CD107b 存在于溶酶体环境中，一小部分与细胞膜相关（Nabi 等人，1991）。
已证明 CD107b 与人、小鼠和大鼠的 CD107b 在 N 端氨基酸序列上具有高度同源性（Nabi 等人，1993）。
用 beta1-6-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶 V 转染貂 II 型肺上皮细胞系，显示形成了大的溶酶体空泡，称为多层体（MLBs），具有非常独特的 表型 并表达 CD107b，如克隆 AC17 的免疫荧光染色所示。这些多层体的形成需要通过自噬途径进行溶酶体降解，这可能与溶酶体贮积症有关（Hariri 等人，2000）。CD107b 参与细胞质蛋白的溶酶体摄取和内吞途径。
小鼠抗犬 CD107b 抗体（克隆号 AC17）适用于电子显微镜（Nabi 等人，1991）。
储存信息
本产品在环境温度下运输。建议收到产品后分装并储存在 -20°C。解冻后，根据需要分装样品。短期使用（最多 4 周）可将分装样品保存在 2-8°C，其余分装样品保存在 -20°C。
避免反复冻融，因为这可能导致抗体变性。不建议储存在无霜冰箱中。
避免反复冻融，因为这可能导致抗体变性。不建议储存在无霜冰箱中。
应用
据报道，本产品在以下应用中有效。此信息来源于我们实验室的内部测试、同行评审的出版物或原始开发者的个人交流。请参阅所示参考文献以获取更多信息。有关通用实验方案建议，请访问 抗体实验方案 页面。
| 应用名称 | 已验证 | 最小稀释比 | 最大稀释比 |
|---|---|---|---|
| 流式细胞术 1 | ✓ | 1/50 | 1/200 |
| 免疫荧光 | ✓ | ||
| 免疫沉淀 | ✓ | ||
| Western Blotting | ✓ | 1/100 | 1/500 |
- 1 此应用需要进行膜通透化处理。为此，建议使用 Leucoperm（产品代码 BUF09）。
若本产品未针对特定技术进行测试，这并不一定排除其在该程序中的使用。建议的工作稀释度仅供参考。建议用户在其自身系统中使用适当的阴性/阳性对照对产品进行滴度测试。
- 流式细胞术
- 使用 10ul 建议的工作稀释度标记 100ul 中的 1x106 个细胞。
FAQ
1. 这款抗体适用于哪些实验技术？
根据产品详情，该抗体已验证适用于流式细胞术、免疫荧光、免疫沉淀和Western Blotting。
2. 抗体识别的靶点是什么？
该抗体特异性识别犬的CD107b，也称为溶酶体相关膜蛋白2（LAMP-2）。
3. 该抗体推荐的储存条件是什么？
建议收到产品后分装，并储存在-20°C。短期使用（最多4周）可保存在2-8°C。应避免反复冻融，且不建议储存在无霜冰箱中。
4. 进行流式细胞术实验时需要注意什么？
进行流式细胞术实验时，需要进行膜通透化处理。产品信息中建议使用Leucoperm（产品代码BUF09）进行此项处理。
Mouse anti Dog CD107b antibody, clone AC17 recognizes canine CD107b, otherwise known as lysosome-associated membrane protein 2 or LAMP-2. Immunofluorescence staining of MDCK cells with mouse anti dog CD107b, clone AC17 demonstrates staining patterns consistent with localization to lysozomes. This is supported by coincident staining of an exogenous lysozomal glycoprotein, avian LEP100 transfected into MDCK cells and detected using the anti LEP100 antibody clone CV24 (Nabi et al.1991).
Mouse anti Dog CD107b antibody, clone AC17 immunoprecipitates a protein of ~95 kDa in MDCK cells which, following Endo F digestion to remove N-linked oligosaccharides, yields a core protein product of 40 kDa, indicating the heavily glycosylated nature of CD107b. The molecular weight of canine CD107b is typical of many lysozome-associated membrane proteins. While most (97%) CD107b resides in the lysozomal environment in adherent MDCK cells in vitro, a small percentage is associated with the cell membrane (Nabi et al.1991).
CD107b has been shown to share high N-terminal amino acid sequence homology with human, mouse and rat CD107b (Nabi et al.1993).
Transfection of a mink type II lung epithelial cell line with beta1-6-N-acetylglucosaminyl transferase V demonstrates the formation of large lysozomal vacuoles, termed multilamellar bodies (MLBs), having a very distinct phenotype with expression of CD107b, as indicated by immunofluorescent staining with clone AC17. These MLBs require lysozomal degradation via an autophagic pathway for their formation and may have implications for lysozomal storage diseases (Hariri et al.2000). CD107b is involved in the lysosomal uptake of cytosolic proteins and the endocytic pathway.
Mouse anti Dog CD107b antibody, clone AC17 is suitable for use in electron microscopy (Nabi et al.1991).
Mouse anti Dog CD107b antibody, clone AC17 immunoprecipitates a protein of ~95 kDa in MDCK cells which, following Endo F digestion to remove N-linked oligosaccharides, yields a core protein product of 40 kDa, indicating the heavily glycosylated nature of CD107b. The molecular weight of canine CD107b is typical of many lysozome-associated membrane proteins. While most (97%) CD107b resides in the lysozomal environment in adherent MDCK cells in vitro, a small percentage is associated with the cell membrane (Nabi et al.1991).
CD107b has been shown to share high N-terminal amino acid sequence homology with human, mouse and rat CD107b (Nabi et al.1993).
Transfection of a mink type II lung epithelial cell line with beta1-6-N-acetylglucosaminyl transferase V demonstrates the formation of large lysozomal vacuoles, termed multilamellar bodies (MLBs), having a very distinct phenotype with expression of CD107b, as indicated by immunofluorescent staining with clone AC17. These MLBs require lysozomal degradation via an autophagic pathway for their formation and may have implications for lysozomal storage diseases (Hariri et al.2000). CD107b is involved in the lysosomal uptake of cytosolic proteins and the endocytic pathway.
Mouse anti Dog CD107b antibody, clone AC17 is suitable for use in electron microscopy (Nabi et al.1991).
储存信息
This product is shipped at ambient temperature. It is recommended to aliquot and store at -20°C on receipt. When thawed, aliquot the sample as needed. Keep aliquots at 2-8°C for short term use (up to 4 weeks) and store the remaining aliquots at -20°C.
Avoid repeated freezing and thawing as this may denature the antibody. Storage in frost-free freezers is not recommended.
Avoid repeated freezing and thawing as this may denature the antibody. Storage in frost-free freezers is not recommended.
应用
This product has been reported to work in the following applications. This information is derived from testing within our laboratories, peer-reviewed publications or personal communications from the originators. Please refer to references indicated for further information. For general protocol recommendations, please visit the antibody protocols page.
| Application Name | Verified | Min Dilution | Max Dilution |
|---|---|---|---|
| Flow Cytometry 1 | ✓ | 1/50 | 1/200 |
| Immunofluorescence | ✓ | ||
| Immunoprecipitation | ✓ | ||
| Western Blotting | ✓ | 1/100 | 1/500 |
- 1 Membrane permeabilization is required for this application. The use of Leucoperm (Product Code BUF09) is recommended for this purpose.
Where this product has not been tested for use in a particular technique this does not necessarily exclude its use in such procedures. Suggested working dilutions are given as a guide only. It is recommended that the user titrates the product for use in their own system using appropriate negative/positive controls.
- Flow Cytometry
- Use 10ul of the suggested working dilution to label 1x106 cells in 100ul
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文献和实验该产品被引用文献
References for CD107b antibody
- Nabi, I.R. et al. (1991) An endogenous MDCK lysosomal membrane glycoprotein is targeted basolaterally before delivery to lysosomes.
J Cell Biol. 115 (6): 1573-84. - Nabi, I.R. & Rodriguez-Boulan, E. (1993) Increased LAMP-2 polylactosamine glycosylation is associated with its slower Golgi transit during establishment of a polarized MDCK epithelial monolayer.
Mol Biol Cell. 4 (6): 627-35. - Hariri, M. et al. (2000) Biogenesis of multilamellar bodies via autophagy.
Mol Biol Cell. 11: 255-68. - Jou, T.S. et al. (2000) Selective alterations in biosynthetic and endocytic protein traffic in Madin-Darby canine kidney epithelial cells expressing mutants of the small GTPase Rac1.
Mol Biol Cell. 11 (1): 287-304. - Ihrke, G. et al. (2001) Competing sorting signals guide endolyn along a novel route to lysosomes in MDCK cells.
EMBO J. 20 (22): 6256-64. - Cliffe, S.T. et al. (2009) SLC29A3 gene is mutated in pigmented hypertrichosis with insulin-dependent diabetes mellitus syndrome and interacts with the insulin signaling pathway.
Hum Mol Genet. 18: 2257-65. - Pluhar, G.E. et al. (2010) Anti-tumor immune response correlates with neurological symptoms in a dog with spontaneous astrocytoma treated by gene and vaccine therapy.
Vaccine 28 (19): 3371-8. - Nagahama, M. et al. (2011) Cellular vacuolation induced by Clostridium perfringens epsilon-toxin.
FEBS J. 278: 3395-407.
Further Reading
- Fukuda, M. (1991) Lysosomal membrane glycoproteins. Structure, biosynthesis, and intracellular trafficking.
J Biol Chem. 266 (32): 21327-30.
相关实验
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