土壤中性蛋白酶试剂盒 微量法

【求助】土壤微生物总DNA的提取及细菌16S rDNA的PCR扩增出问题了，寻求大家的帮助！

tyuanc 我用MO Bio的soil DNA Isolation Kit提取土壤总DNA，提取的DNA直接跑胶，看不见任何条带，采用细菌16S rDNA通用引物（27F和1492R)进行PCR扩增，也没有结果，有一次我将试剂盒提取的DNA50倍稀释后，进行细菌16S rDNA的PCR扩增，扩增出了目的条带，我所用的酶为Takara的LA Taq，用普通的Taq酶扩增不出来，但隔了一周后再去重复，什么条件都一样，却再也扩不出来了，我重新提取了新的DNA进行

枯草杆菌（Bacillus subtilis）

又称枯草芽孢杆菌。一种分布普遍的腐生细菌，容易从土壤微生物中分离得到。细胞杆状，大小为0.7～ 0.8× 2～ 3微米。革兰氏阳性反应。细胞周身具多条鞭毛。能产生芽孢，椭圆形到柱状，位于菌体中央或一端。细胞分裂后产生的细胞可以连成丝状。菌落粗糙，不透明，无闪光，扩张，污白色或微黄色。枯草杆菌可用做制取淀粉酶和蛋白酶，如枯草杆菌 Bf7658是生产淀粉酶的主要菌种；枯草杆菌 AS1.398是生产中性蛋白酶的主要菌种。淀粉酶在纺织、食品和发酵工业上应用广泛，蛋白酶在鞣革、轻工和医药工业上有

DNA纯化去杂质

这周讨论一项常用的技术，即使常用但仍引起部分人核酸分离焦虑症。那就是基因组DNA的纯化去杂质。 场景是这样的：你有一份采自南太平洋中部一个偏僻小岛上首次发现的古老兰花品种根际土壤样品。你使用了非PowerSoil Kit法提取其中的微生物DNA。最终DNA含有太多杂质，无法PCR扩增。因此需要去除腐植酸等PCR抑制因子。你需要所有的核酸分子通过全基因组鸟枪测序……怎么办？ 你致电MO BIO说了你的大概情况，而我们推荐了使用PowerClean Kit