V型AAO模板 开口400nm 下端100nm

经验分享｜动物活体光学成像实验——荧光成像（一）【自发荧光】

动物活体荧光成像实验中，一般利用荧光蛋白选择性地标记目标细胞，或用荧光染料标记药物，再通过活体成像系统进行详细观察。但是在荧光成像过程中，当观察目标的荧光信号微弱时，自身荧光会干扰目标荧光的识别。自发荧光是指由细胞结构或代谢产物等产生的自然荧光。从小分子（糖、脂肪酸、氨基酸、核苷酸、离子和水等）和大分子（蛋白质、磷脂、RNA、DNA 和多糖等）到更大的结构（如细胞器和细胞膜），覆盖了大部分可见光谱范围（400-700 nm）。自发荧光与标记物发射波长重叠的时候，经激发光照射会发射出与标记物相

Caspase活性检测系列（分光光度法）检测原理及操作指南

并混匀，注意避免气泡产生。 E、在加入Ac-特异性多肽-pNA混匀后，37℃孵育2~4 h。发现颜色变化较明显时即可测定OD405。如果颜色变化不明显可适当延长孵育时间，甚至可孵育过夜。 F、用酶标仪或分光光度计（100 μL比色皿）在λ=405 nm或400 nm测定样本吸光值。 G、通过计算OD样本值/OD阴性对照的倍数来确定凋亡诱导剂组Caspase 3的活化程度。 四、结果判断 Caspase的活性与AC-特异性多肽-pNA的分解量强弱成正比。 参考

一作专访丨新型多模态探针精准「锁定」肿瘤--论文分享解读

1. 近红外荧光 / 光声双模态成像小知识 荧光成像凭借高时空分辨率、高灵敏度等优势广泛用于生物医学研究，其中近红外成像因穿透深、光毒性低、组织自发荧光干扰小，成为肿瘤诊疗研究热点。荧光纳米探针可调控组分尺寸实现近红外成像，还可修饰赋予靶向、载药、多模态检测能力。[29] 传统探针多工作于可见光与第一近红外区（400-900 nm），受穿透深度、空间分辨率限制，应用受限。第二近红外区 NIR-II（1000-1700 nm）光散射弱、背景荧光低，适合深层组织成像，但单一荧光模态仍难以兼顾活体