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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
DNA Gyrase(E.coli)
- 库存:
大量
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 规格:
100U/盒
产品及特点:
DNA 促旋酶 (E. coli ) 是一种 II 型拓扑异构酶,在 ATP 存在下向 DNA 中引入负超螺旋。促旋酶全酶是由两个 gyrA 亚基 (97 kDa) 和两个 gyrB(90 kDa) 亚基组成的异源四聚体。本产品具有下列用途:向 DNA 引入负超螺旋。其反应原理图如下:
活性单位定义
1 单位是指在 30 μl 反应体系中,37℃条件下,30 分钟内催化超过 95% 的0.5 μg 底物转变为超螺旋质粒所需的酶量。DNA 超螺旋化通过不含溴化乙啶的琼脂糖凝胶电泳来检测。
DNA 促旋酶(E. coli )-DNA Gyrase(E.coli)反应条件
1X DNA 促旋酶 (E. coli ) 反应缓冲液 [35 mM Tris-HCl,24 mM KCl,4mM MgCl2,2 mM DTT,1.75 mM ATP,5 mM 亚精胺,0.1 mg/ml BSA,6.5%甘油 (pH 7.5 @ 25℃) ]。37℃ 温育。
Buffer 成分
10 mM Tris-HCl,50 mM KCl,2 mM DTT,50% Glycerol,0.1 mMEDTA,pH 7.5 @ 37℃
热失活
65℃ 20 分钟。DNA Marker Ⅴ(条带200.400.700.1000.1500.2000) 50T
DNA Marker Ⅴ(条带200.400.700.1000.1500.2000) 500T
DNA MarkerⅥ(条带250.1000.2500.5000.7000.10000) 50T
DNA MarkerⅥ(条带250.1000.2500.5000.7000.10000) 500T
DNA Marker Ⅶ(条带300.500.1000.1500.2000.2500) 50T
DNA Marker Ⅶ(条带300.500.1000.1500.2000.2500) 500T
50bp DNA Marker(条带50.100.150.200.250.300.250.400) 50T
50bp DNA Marker(条带50.100.150.200.250.300.250.400) 500T
50bp Plus(条带50.100.150.200.250.300.350.400.500.600.1000) 50T
50bp Plus(条带50.100.150.200.250.300.350.400.500.600.1000) 500T
100bp DNA Marker(100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500) 50T
100bp DNA Marker(100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500) 500T
100bp Plus(100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500.2000.3000.5000) 50T
100bp Plus(100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500.2000.3000.5000) 500T
200bp(条带200.400.600.800.1000.1200.1400.1600.1800.2000.3000) 50T
200bp(条带200.400.600.800.1000.1200.1400.1600.1800.2000.3000) 500T
250bp(条带250.500.750.1000.1500.2000.2500.3000.5000) 50T
250bp(条带250.500.750.1000.1500.2000.2500.3000.5000) 500T
300bp(条带300.600.900.1200.1500.1800.2500.3000.5000) 50T
300bp(条带300.600.900.1200.1500.1800.2500.3000.5000) 500T
500bp(500.1000.1500.2000.2500.3000.3500.5000) 50T
500bp(500.1000.1500.2000.2500.3000.3500.5000) 500T
1kb DNA Marker(条带1000.2000.3000.4000.5000.6000.8000.10000) 50T
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文献和实验为存在于细菌中 2型拓扑异构酶的一种。可将双螺旋 DNA的股解开导入负的超螺旋(使 W数变负)的独特的酶。大肠杆菌的促旋酶为由 2种多肽链各二分子所形成的四聚体,其中的二种肽链则分别由基因 Gyr A和 Gyr B所产生,分子量各为 11.5万和 9.5万,拓扑学异构化是通过双链的暂时切断而进行,作为其中间产物,在四核苷酸对分离的地方形成裂缝,酶分子与 3′ -OH游离端和 5′ -磷酸末端形成共价键的形式。此酶的催化作用有是:在 ATP的存在下,使弛缓型的闭环状 DNA
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