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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
Magbead Saliva DNA Extraction Kit
- 库存:
479
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货磁珠法唾液DNA提取试剂盒打折促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货磁珠法唾液DNA提取试剂盒打折促销
品牌:百奥莱博
英文名:Magbead Saliva DNA Extraction Kit
产地:国产|进口
本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的唾液DNA提取方法,适用于从在保护液 中保存的唾液中提取DNA。在高盐存在时,DNA结合于硅基包被的Magbeads表面。 漂洗后,高纯度的DNA被洗脱于Buffer EB或去离子水中。DNA的得率与样品中细胞数 量,储存条件、时间有很大关系。纯化得到的DNA纯度好(A260/280在1.7-1.9之间, A260/230大于1.5),完整度高(大于15 kb),可用于二代测序、芯片检测、PCR检测等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 96次 |
| Buffer ML | 24ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 80ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 50ml |
| Buffer MW3 | 96ml |
| Buffer EB | 30ml |
| 蛋白酶K | 2×25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 2×1.25ml |
| Magbeads PN | 1ml |
自备仪器及试剂:
1、手动单管操提取:
1)恒温混匀仪
2)2/15ml磁力架
3)异丙醇、无水乙醇
2、手动96孔深孔板提取:
1)恒温混匀仪
2)废液抽吸系统
3)手动连续分液器
4)电动连续分液器
5)手动连续分液器分液管(25ml)
6)96孔深孔板磁力架
7)异丙醇、无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/25mg)的蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配置好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、Magbeads严禁冰冻、高速离心。冰冻和高速离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇并做好标记。
4、如Buffer ML中出现沉淀,请在56℃水浴锅中重新溶解,摇匀后即可使用。
5、实验过程中,磁珠在溶液中的充分混匀对提取的得率与纯度都有很大的影响。实验过程中务必使磁珠与溶液充分混匀。不同厂家生产的恒温混匀仪效果有一定差异,实验过程中请注意观察磁珠状态。如出现磁珠贴壁等未充分混匀的现象,请用移液器吹吸混匀或调整震荡频率。
操作步骤:
一、手动单管操作:
1、转移400μl唾液与保护剂的混合溶液至1.5ml离心管中,然后16000×g离心1分钟。
2、将离心管从离心机中取出,转移300μl上清液至新的1.5ml离心管中,之后向新的离心管加入20μl 蛋白酶K 和200μl Buffer ML。涡旋震荡混匀后,将新离心管放入56℃水浴锅中孵育1小时。此时可弃去旧离心管。
3、将离心管从水浴锅中取出,室温放置5分钟后短暂离心使溶液回流于离心管底部。向离心管中加入310μl充分混匀的异丙醇(300μl)与Magbeads(10μl)混合物,涡旋震荡5秒钟后立即放于25℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡混匀5分钟。
4、将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
5、将离心管从磁力架上取下,加入750μl Buffer GW1(加入前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋点震5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡混匀2分钟(震荡过程确保Magbeads处于悬浮混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后充分弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
6、重复步骤5。
7、将离心管从磁力架上取下,加入750μl Buffer GW2(加入前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋点震5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡混匀2分钟(震荡过程确保Magbeads处于悬浮混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后充分弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
8、重复步骤7。
9、选择步骤:
1)保持离心管固定于磁力架上,用移液器去除离心管管底和管盖上的溶液,之后室温放置5-10分钟使乙醇充分挥发干净。如离心管侧壁上有液珠,可向离心管中加入750μl无水乙醇。盖盖后颠倒离心管,之后充分弃去溶液。
2)保持离心管固定于磁力架上,向离心管中加入750μl Buffer MW3,待悬起的磁珠重新吸附于磁力架上后立即充分弃去溶液。
10、将离心管从磁力架上取下,加入50-200μl Buffer EB。涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中后将其放于56℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡洗脱10分钟,或将离心管在56℃水浴锅中孵育10分钟,期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。
11、将离心管放于磁力架上静置2分钟,待Magbeads充分吸附于离心管侧壁后用移液器将溶液转移至新的离心管中-20℃保存备用。
二、手动96孔板操作:
1、向2.0ml的96孔深孔板(简称“深孔板”)中加入500μl唾液与保护剂的混合溶液,然后在水平离心机上2000×g离心5分钟。
2、将深孔板从离心机中取出,取300μl上清液至新的深孔板中,之后向新的深孔板中加入20μl 蛋白酶K 和200μl Buffer ML。用硅胶盖将新的深孔板封闭后将其放于恒温混合仪上1500 rpm震荡2分钟,之后将新的深孔板放于56℃水浴锅中孵育1小时。此时可将旧的深孔板弃去。
3、将深孔板从水浴锅中取出,固定于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡5分钟。
4、将深孔板从恒温混匀仪取下,短暂离心后打开硅胶盖。向深孔板中加入310μl充分混匀的异丙醇(300μl)与Magbeads(10μl)混合物,盖上硅胶盖后立即将深孔板固定于25℃、1500 rpm恒温混匀仪上震荡5分钟。
5、将深孔板从恒温混匀仪上取下放于96孔板磁力架上静置2分钟,之后用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
6、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW1(加入前检查是否已加入无水乙醇),之后将深孔板固定于25℃、1500 rpm恒温混匀仪上震荡2分钟。
7、将深孔板从恒温混匀仪上取下放于96孔板磁力架上静置2分钟,之后用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
8、重复步骤6-7。
9、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW2(加入前检查是否已加入无水乙醇),之后将深孔板固定于25℃、1500 rpm恒温混匀仪上震荡2分钟。
10、将深孔板从恒温混匀仪上取下放于96孔板磁力架上静置2分钟,之后用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
11、重复步骤9-10。
12、将深孔板从恒温混匀仪上取下放于96孔板磁力架上静置2分钟,之后用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
13、保持深孔板固定于96孔板磁力架上,将深孔板倒置于干净的吸水纸上放置2分钟。之后将深孔板放于100℃(由于深孔板未与加热模块直接接触,管底实际温度在50-60℃之间)的恒温混匀仪上静置5分钟。
14、用电动连续分液器或8通道移液器向深孔板中加入100-200μl Buffer EB,之后将深孔板放于100℃、1500 rpm恒温混匀仪上震荡10分钟。
15、将深孔板从恒温混匀仪上取下放于96孔板磁力架上静置2分钟,用8通道移液器将溶液转移至96孔板板中盖盖后-20℃保存备用。
储存条件:室温(15~30℃)
更多有关北京现货磁珠法唾液DNA提取试剂盒打折促销的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·血液RNA提取试剂盒(含DNase I)
编号:WE0197
英文名称:RNAtiqu Blood RNA Extraction Kit(DNase I)
规格:50次
本试剂盒适用于从新鲜全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)中提取总RNA,可处理多至1.5ml的全血,洗脱得到分子量大于200 bp的高纯度RNA,多个样品可以在1小时内同时完成。本产品无需CsCl纯化的超离心步骤和LiCl或乙醇沉淀,不含有*酚或*仿等有毒溶剂,经过纯化的RNA有效去除血红素、肝素等酶抑制剂和污染物,可直接用于各种分子生物学常规实验,如RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| DNase I | 1000 U |
| 10×Reaction Buffer | 1000μl |
| Buffer RBL(10×) | 60ml |
| Buffer RL | 35ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 过滤柱FL及收集管 | 50套 |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
保存条件:DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存,其它组分室温(15~30℃)。
自备试剂:β-巯基乙醇、无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2)配制溶液应使用无RNase的水。
3)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、样品应避免反复冻融,否则影响提取RNA提取得率和质量。样品在Buffer RL中,可于-70℃保存一个月。
3、Buffer RL在使用前请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer RL加10μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RL室温可保存1个月。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer RL是否出现结晶或者沉淀,可置于于56℃水浴重新溶解。
6、本试剂盒不能用于加入抗凝剂的冷冻血液样本RNA的提取。
7、10×Buffer RBL需在使用前将溶液用无RNase的水进行10倍稀释,稀释后置于2~8℃保存。
操作步骤:
1、向新鲜的抗凝全血样本中,加入5倍血液样本体积的1×Buffer RBL(请于使用前用无RNase水将10×Buffer RBL稀释10倍),轻轻涡旋或颠倒混匀。冰上孵育10-15分钟,孵育过程中混匀两次。
注意:孵育过程中浑浊的悬液会变成透明,证明红细胞被裂解,必要时可以把孵育时间延长至20分钟。
2、4℃ 2,100 rpm(~400×g)离心10分钟,小心吸弃上清。
3、向以上沉淀中加入2倍血液样本体积的1×Buffer RBL(请于使用前用无RNase水将10×Buffer RBL稀释10倍),轻轻涡旋,充分重悬沉淀。
4、4℃ 2,100 rpm离心10分钟,小心并彻底吸弃上清。
注意:此步一定要完全去除上清否则影响裂解导致RNA产量下降。
5、向沉淀中加入Buffer RL(使用前检查是否已经加入β-巯基乙醇),具体加量按照下表进行,涡旋混匀。
注意:如果血液不是健康人的全血,需要根据血液中白细胞的数量来确定所需Buffer RL的加入量。完全混匀后细胞应完全裂解,块状沉淀消失。
| Buffer RL(μl) | 健康人类全血(ml) | 白细胞数量 |
| 350 | 小于0.5 | 多至2×106 |
| 600 | 0.5-1.5 | 2×106 至1×107 |
6、将以上所得液体转移到已装入收集管的过滤柱中,12000rpm(~~13400×g)离心2分钟,收集滤液,弃掉过滤柱。
7、向滤液中加入1倍体积(600μl或350μl)的70%乙醇(无RNase水配制),混匀。
注意:加入乙醇后可能会产生沉淀,不会影响后续实验。
8、将上步所得溶液全部加入到吸附柱中(已装入收集管),若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心15秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1,12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
10、配制DNase I 混合液:取52μl RNase-Free Water,向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl),混匀, 配制成终体积为80μl的反应液。
11、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液,20-30℃孵育15分钟。
12、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1,12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
13、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心15秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
14、重复步骤13。
15、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
16、将吸附柱置于一个新的RNase-Free的1.5ml离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
注意:
1)RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water再次洗脱,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟。
3)如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟。
储存条件:室温(15~30℃)。
北京现货磁珠法唾液DNA提取试剂盒打折促销关键词:Magbead Saliva DNA Extraction Kit,WE0207,磁珠法唾液DNA提取试剂盒
·口腔拭子DNA样本保存管
编号:WE0400
英文名称:Swab DNA Storage Tube
规格:200μl×20支
本产品采用医疗专用的聚*脂海绵为原材料,具有吸液性强、柔软洁净、发尘量低等优点。采样拭子头可折断,使用方便。采用的物料对微生物无毒害,能大量地增加样本的采集、释放量,增强样本送检期间的保存效果。能够常温保存口腔拭子DNA长达12个月,其获得的DNA可用来完成各种基因检测及分析实验,如qPCR、NGS、SNP分析。为运输和存储提供方便,并减低其成本。
使用方法:
1.取样前清洁双手,用清水漱口1-2次,去除口腔中的食物残渣,咽尽口腔中剩余的清水。
2.撕开采样棉签外包装。
3.将棉签伸进口腔内,在内侧颊粘膜处反复擦拭20次以上,至棉头已经被唾液充分浸润(应无食物残渣等异物粘附)。
4.打开样本采集管盖,将采样后的棉签放入样本采集管内,沿手柄上的折痕折断手柄。
5.随即盖上样本采集管,完成样品取样。
北京现货磁珠法唾液DNA提取试剂盒打折促销关键词:Magbead Saliva DNA Extraction Kit,WE0207,磁珠法唾液DNA提取试剂盒
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