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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Micro BCA Protein Assay Kit
- 库存:
953
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应WE0273型微量BCA蛋白定量试剂盒促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:WE0273型微量BCA蛋白定量试剂盒促销
英文名:Micro BCA Protein Assay Kit
产地:国产|进口
规格:1600次微孔板(50管次)
品牌:百奥莱博
BCA蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于BCA(Bicinchoninic Acid)法研制而成,实现了对蛋白质进行快速、 稳定、 灵敏的浓度测定。 其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与Cu2+络合生成络合物,同时将Cu2+还原成Cu+。BCA试剂可敏感特异地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物。在562 nm处有高的光吸收值,颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒专为低蛋白浓度样品的蛋白定量而设计,可精确测定浓度为2.5-200μg/ml的蛋白溶液,试剂盒的灵敏性高,平行性好,不同种蛋白之间的测量差异极低。本试剂同多种非离子型去污剂有较好的相容性。
试剂盒组成:
| 组成 | 规格 |
| Micro BCA Reagent A(MA) | 120ml |
| Micro BCA Reagent B(MB) | 120ml |
| Micro BCA Reagent C(MC) | 6ml |
| BSA Standard Solution(2mg/ml) | 2ml |
保存条件:BSA Standard Solution:2~8℃,其它组分:室温
注意事项:BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用1×PBS或0.9%生理盐水进行稀释)。
使用方法:
1、稀释BSA标准品:用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。
| 管号 | 稀释液用量(μl) | 标准品用量(μl) | 最终浓度(μg/ml) |
| A | 360 | 40 | 200 |
| B | 400 | 100(从A管中取) | 40 |
| C | 250 | 250(从B管中取) | 20 |
| D | 250 | 250(从C管中取) | 10 |
| E | 250 | 250(从D管中取) | 5 |
| F | 250 | 250(从E管中取) | 2.5 |
| G | 250 | 0 | 0(空白) |
2、配制Micro BCA测试工作液:根据标准品和样品的数量配制测试液。
试剂MD配制:4 volume MC + 100 volume MB
测试工作液WR配制: 1 volume MA + 1 volume MD
充分混匀后待用。
3、试管及微板检测(蛋白浓度检测范围:2.5-200μg/ml)
1)按上表准备好标准品及待测样品。
2)将蛋白样品和测试工作液WR按照1:1(体积比)比例充分混匀。在60℃孵育60分钟。建议:标准96孔微孔板测试以300μl/孔为最佳。
3)孵育完成后冷却到室温,在562 nm处读取吸光度值。
4)标准品与待测样品的吸光度值要扣除空白对照的吸光度值,然后进行浓度的计算。
5)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。
附表1. 干扰物质表
| 化合物 | 耐受浓度 |
| 缓冲液 | |
| 乙酸盐 | 0.2M |
| 甘*酸 | 1M |
| HEPES | 0.1M |
| MES | 50mM |
| MOPS | 50mM |
| Na+-柠檬酸 | <1mM |
| PIPES | 50mM |
| 磷酸* | 0.1M |
| 乙酸* | 0.2M pH 5.5 |
| TES | 50mM |
| Tris | 0.1M |
| 盐类 | |
| 硫*(代"酸")铵 | 干扰 |
| NaCl | 1M |
| 尿素 | 3M |
| 极性化合物 | |
| DMSO | 5% |
| 甘油 | 10% |
| 去垢剂和变性剂 | |
| Brij35 | 1% |
| CHAPS | 1% |
| 盐*(代"酸")胍 | 4M |
| NP-40 | 1% |
| 辛葡糖 | 1% |
| SDS | 1% |
| Triton X-100 | 1% |
| 糖类 | |
| 葡萄糖 | 10mM |
| 蔗糖 | 1M |
| 螯合剂 | |
| EDTA | 100mM |
| 还原剂 | |
| β-巯基乙醇 | 50μM |
| DTT | 1mM |
| 其他 | |
| 脂类 | 干扰 |
| HCl/NaOH | 0.1M |
储存条件:2~8℃
关于WE0273型微量BCA蛋白定量试剂盒促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·超纯dNTP混合液(10 mM)
编号:WE0160
英文名称:UltraPure dNTP Mix(10 mM each)
规格:1ml|5ml
本产品是dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩尔数混合物(各10mM),可与所有的耐热聚合酶配套使用。UltraPure dNTP纯度均达到99%以上。
使用方法:
UltraPure dNTP(10 mM each)可直接使用,或用调节至中性(PH7.5 左右)的无菌超纯水稀释至适当浓度使用。可用于要求较高的PCR反应(如Real-time PCR)、DNA序列测定、分子标记、cDNA合成等。
储存条件:-20℃。
·G250蛋白快速染色试剂
编号:WE0290
英文名称:ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
规格:250ml
该产品是以考马斯亮蓝G-250染料为基础,应用于SDS-PAGE凝胶的快速蛋白染色试剂。灵敏度高,最低可检测到20ng蛋白。染色过程简单,快速,无需孵育,染色后直接水洗,即可产生清晰背景。
注意事项:
1、若要获得最佳的脱色效果,可多次重复脱色步骤或在去离子水中脱色过夜。
2、将凝胶加入染色液后加热至沸腾,继续在脱色摇床上摇动5分钟,可增强染色效果。
3、本产品可重复使用2-3次,染色效果会随使用次数增加有所减弱。
4、本产品有轻微腐蚀性,请带手套操作。
操作步骤:
1、将电泳后的 PAGE 胶取出放入容器中,加入适量纯水(以充分覆盖PAGE 胶为宜),加热至沸腾后停止,弃去液体。
2、加入适量快速染色液(液面覆盖凝胶即可),加热至沸腾后停止,弃去染色液。
3、加入适量蒸馏水,加热至沸腾后停止,倾去蒸馏水,重复此步骤脱色至背景清晰。
实验图例
使用ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂对SDS-PAGE染色后,不同浓度蛋白染色结果
储存条件:-20℃
WE0273型微量BCA蛋白定量试剂盒促销关键词:Micro BCA Protein Assay Kit,WE0273,微量BCA蛋白定量试剂盒
·100bp DNA Ladder
编号:WE0244
规格:100次(500μl)|500次(5×500μl)
100 bp Ladder由9条DNA片段组成,分别为1,500 bp、1000bp、800 bp、600 bp、500 bp、400 bp、300 bp、200 bp和100 bp。和本产品已含有1×Loading Buffer的DNA溶液,可取5μl直接电泳,使用十分方便;电泳时500 bp的DNA片段量约为150ng,显示亮带,其他条带的DNA量约为50ng。
注意事项:
1、本产品可直接化冻混匀使用,无需加热。
2、请及时更换电泳缓冲液并使用新制琼脂糖凝胶,以免影响电泳结果。
3、DNA琼脂糖凝胶电泳时,凝胶的纯度对DNA条带的清晰度影响很大,因此尽量选用质量好的琼脂糖,推荐凝胶浓度为1%-3%,电压4-8 v/cm。
4、凝胶浓度与DNA片段的分离性能关系密切。凝胶浓度越大,对短片段DNA分离性能越好;反之,凝胶浓度越小,越有利于长片段DNA的分离。
使用方法:
取5μl 加入琼脂糖凝胶的加样孔中(如果加样孔较宽,大于6mm时,须适当增加上样量),进行电泳。
1%琼脂糖凝胶电泳图(5μl)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期24个月。
·HRP标记山羊抗人IgG(H+L)
编号:WE0375
英文名称:Goat Anti-Human IgG, HRP Conjugated
规格:100μl
本产品为辣根过氧化物酶标记的经亲和纯化的山羊抗体,特异识别人的IgG的重链和轻链,检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG 无明显交叉反应,可用于Western Blot、ELISA 和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:人IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB(1:2000-10000)
ELISA(1:2000-20000)
Immunohisto/Cytochemistry(1:100-200)
WE0273型微量BCA蛋白定量试剂盒促销关键词:Micro BCA Protein Assay Kit,WE0273,微量BCA蛋白定量试剂盒
·50×TAE
编号:WE0216
规格:500ml
本品为50×Tris-乙酸缓冲液,是常用的核酸电泳缓冲液。
·RRX标记驴抗大鼠IgG(H+L)
编号:WE0369
英文名称:Donkey Anti-Rat IgG, Rhodamine Red-X Conjugated
规格:100μl
本产品为RRX标记的经抗原亲和纯化的驴抗体,特异识别大鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低。Rhodamine Red-X(RRX)是近年新开发的一种荧光素,被激发后产生较明亮的红色荧光。它比普通的荧光更加明亮,更加不容易淬灭,且背景更低。由于其发射波长介于Cy2(或FITC)和Cy5中间,且重叠较少,RRX可与Cy2和Cy5一起用于同一样本的多重标记检测。
免疫原:大鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:Rhodamine Red-X,Amax=570; Emax=590
应用范围:对于大多数实验(1:50-200)
·DAB显色试剂盒(WB IHC)
编号:WE0323
英文名称:DAB Kit(20×)
规格:20ml|100ml
DAB是HRP的常用底物,在辣根过氧化物酶的催化下,DAB会产生不溶于水和乙醇的棕色沉淀。该试剂盒适用于HRP系统的的免疫组化中的组织切片、细胞爬片以及Western Blot中PVDF膜、NC膜等的染色。辣根过氧化物酶可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为褐色的化合物,可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。
试剂盒组成:
| 组份 | 20ml | 100ml |
| 20×DAB-A | 1ml | 5ml |
| 1×DAB-B | 20ml | 100ml |
注意事项:
1、工作液现配现用,配制好的工作液2~8℃避光1小时内有效。
2、工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织片或印迹膜。
3、显色后的组织切片或细胞爬片可用苏木精或甲基绿复染。
4、对于组织切片,以每张切片用50μl显色工作液计算,1ml 20×DAB为400张切片的用量,3ml为1200张切片的用量。
5、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件。
6、显色后若背景太深,可以考虑延长封闭时间,避免非特异性染色,或者缩短DAB的显色时间;显色后若显色太弱或没有显色,可以考虑增加一抗或二抗的浓度,或者适当延长显色时间。
7、DAB为可疑致癌物,使用时请采取必要的防护措施。
8、本产品仅用于科研,不能用于人体反应或人体治疗。
操作步骤:
1、DAB显色工作液配制:根据需要量,将20×DAB-A和1×DAB-B以1:19的体积比混匀后即为DAB显色工作液。也可选择每毫升DAB-B中滴加1滴(约50μl)DAB-A,混匀即可。
2、显色:
1)印迹膜显色:将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜倾入到DAB工作液中)即可显色。显色时间一般为1-5分钟。显色完毕后,将膜浸入水中,终止反应。
2)组织切片或细胞爬片显色:加适量的DAB显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上即可显色,显色时间一般为1-5分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。
储存条件:2~8℃
北京百莱博科技有限公司是蛋白质研究产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购WE0273型微量BCA蛋白定量试剂盒促销。
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文献和实验法是十分常用的蛋白质比色定量方法,很多试剂供应商都提供基于比色皿和微孔板的BCA蛋白定量试剂盒。BCA蛋白定量法相对于其它比色定量法具有操作简单、稳定、灵敏度高等优点。相对于蛋白质的固有的280nm吸收峰检测,BCA检测法提高了蛋白检测灵敏度和特异性,消除了核酸的干扰,核酸干扰在对细胞裂解物或其他生物样品进行蛋白定量时总是一个难以避免的干扰。在碱性条件下,蛋白将Cu2+ 还原为Cu+ ,Cu+ 与BCA 试剂形成紫色络合物,如图1,其吸光值与蛋白浓度成正比。测定在562nm 处的吸收值,并与标准
目前常用比色法测定样品蛋白的含量:Bradford法(考马斯亮蓝法)、Lowry法(Folin-酚试剂法)、 BCA法等。但各有优缺点,大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同,需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大,大家可以根据具体情况选取。Bradford法(考马斯亮蓝法):考马斯亮蓝G
用于竟争,中和法C) C.O=N+C(C为常数),用于间接法。D) C.O=C×P+N(C为常数),用于间接法。此公式最客观,但对生产厂家要求很高,阴阳性对照测定值要基本恒定。报告方式定量分析 用已知量的标准品作一系列稀释,ELISA测定,绘制标准曲线,结果以绝对量或单位表示。ELISA的标准曲线每次都要和待测标本做在同一块板上。现有的ELISA定量试剂盒标准曲线只有在较窄的浓度范围内成直线,要得到精确的结果实属不易。因此严禁用定性试剂盒做定量分析。灰区概念把定量分析的正常值范围引入定性分析建立灰区
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