- ¥180 - 1660
- 百奥莱博
- 北京
- WE0270-VAC
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃，避免冷冻
- 保质期：
长期
- 英文名：
Protein G-Sepharose
- 库存：
881
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货Protein G琼脂糖凝胶优惠在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。
名称：Protein G琼脂糖凝胶
规格：5ml
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：Protein G-Sepharose
本产品为Protein G与Sepharose偶联后产物，可从血清，腹水，细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物丌同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。Protein G是链球菌(group C和G)细胞表面蛋白。它不Protein A类似，通过不免疫球蛋白的Fc区相互作用，可结合大多数哺乳动物的IgG。但两者结合特异性有所丌同。Protein G对人IgG3，小鼠IgG1，大鼠IgG2a等具有高亲和力。天然Protein G具有白蛋白和细胞表面结合域。重组Protein G去除了白蛋白和细胞表面结合域，以减少非特异性结合。本产品具有广谱 IgG结合、高Fc段结合活性、高抗体吸附量和性能稳定等特点，可重复多次使用。
注意事项：
1、凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温后装柱，避免产生气泡影响柱效。
2、装柱时尽可能维持凝胶长径比为5:3-2:1，长径比过大将导致洗脱峰拖尾，洗脱体积增大；长径比过小将导致样品与填料接触时间短，吸附不充分，填料吸附蛋白量小。
3、若上样液中抗体浓度过高，应使用平衡缓冲液稀释至1-2 mg/ml，以免上样浓度过高影响柱效。
4、可以采用降低上样时的流速来增加样品与填料接触时间从而提高纯化抗体量。
5、凝胶用低pH缓冲液洗脱时间应尽可能短，洗脱后用中性缓冲液尽快中和至pH中性，以延长亲和介质的使用寿命。
6、洗脱后，应立刻用如中和缓冲液将收集到的抗体溶液中和到中性(pH7.4左右)，以利于维持抗体的生物活性，避免抗体失活。
7、填料使用后应用0.1 M柠檬酸*缓冲液(pH3.0)做再生处理，长期采用极端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命。
使用方法：
I 缓冲液的准备
1、平衡缓冲液：20 mM PBS，150 mM NaCl，pH7.4-8.5。
2、洗脱缓冲液：0.1 M Glycine，pH2.5-3.0。
3、再生缓冲液：1 M NaCl。
4、中和缓冲液：1 M Tris-Cl，pH9.0。
注意：
1)以上缓冲液使用前均需0.45μM滤膜过滤。
2)为提高抗体和介质的吸附力。可适当提高平衡缓冲液中的盐浓度和ph值。
II 样本制备
1、样品用平衡缓冲液稀释5-10倍。
2、细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰，去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。
注意：样品在上柱前需0.45μM微孔滤膜过滤。
III 操作步骤
1、将Protein G-Sepharose填料混匀后加入层析柱，室温静置10分钟，待凝胶与溶液分层后，把底部的出液口打开，让乙醇通过重力作用缓慢流出。
2、向装填后的柱中加入3-5个柱床体积的超纯水将乙醇冲洗干净，用平衡缓冲液流洗5-10个柱床体积平衡柱子。
3、将样品上柱，上样流速60 cm/h。
4、平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积，直至基线平稳。
5、洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱峰，用中和缓冲液将洗脱收集样品中和到中性。
6、立即用5-10个柱床体积平衡缓冲液平衡柱子到中性。
7、再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5个柱床体积。柱子置于2～8℃保存。
注意：操作中如果没有实时的蛋白监测系统，收集洗脱峰时可以分阶段收集到多个管中，最后根据测定结果重新调整收集方式。
8、本产品使用10次以上后先用20%乙醇洗5个柱床体积，再用70%乙醇洗脱5-10个柱床体积，再用20%乙醇流洗3-5个柱床体积。柱子置于2～8℃保存。
储存条件：2～8℃，避免冷冻
关键词：WE0270,Protein G-Sepharose ,Protein G琼脂糖凝胶
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| 编号 | 名称 |
| WE0231 | DNA文库定量试剂盒(Illumina平台) |
| WE0202 | 新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I) |
| WE0315 | 免疫组化试剂盒(鼠源一抗) |
| WE0295 | Western抗体稀释液 |
| WE0290 | G250蛋白快速染色试剂 |
| WE0273 | 微量BCA蛋白定量试剂盒 |
| WE0292 | Western中分子量蛋白Marker |
| WE0250 | Rosetta(DE3)感受态细胞 |
| WE0297 | 一步法快速WB试剂盒(鼠源一抗) |
| WE0225 | RNase A溶液(100mg/ml) |
| WE0219 | IPTG溶液(50mg/ml) |
| WE0379 | RRX标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0256 | 蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合物 |
| WE0185 | 血块基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0358 | DyLight594标记山羊抗人IgG(H+L) |
| WE0375 | HRP标记山羊抗人IgG(H+L) |
| WE0182 | 水产动物基因组提取试剂盒 |
| WE0153 | 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(高含量ROX校正染料) |
| WE0254 | BL21(DE3)pLysS感受态细胞 |
| WE0283 | Tris-甘*酸蛋白电泳液(pH8.3, 10×) |
| WE0246 | 2kb DNA Marker |
| WE0276 | BCA蛋白定量试剂盒 |
| WE0187 | 土壤基因组提取试剂盒 |
| WE0193 | 超纯RNA提取试剂盒(DNase I) |
| WE0188 | 血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板) |
| WE0165 | 酵母质粒提取试剂盒 |
| WE0294 | Western Ladder笔 |
| WE0307 | 低背景ECL化学发光检测试剂盒 |
| WE0235 | 双链DNA荧光定量试剂盒 |
| WE0389 | 生物素化兔抗山羊IgG(H+L) |
| WE0354 | 抗β-Actin单克隆抗体 |
| WE0120 | 血液直接PCR扩增试剂盒 |
| WE0203 | DNA/RNA提取试剂盒 |
| WE0136 | SuperSYBR Mixture(不含ROX校正染料) |
| WE0130 | Real-time RT-PCR MasterMix |
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文献和实验就到 有些抗体有现货，有些抗体没有现货，需要订购。 米宝 只有等着了。。 bianbenjamin 中山金桥，北京的，他们的二抗也是jakson分装的，我个人觉得二抗没有那么关键。 米宝 今天做上了。。问公司要了点进口分装的。。明天看出不出结果了。。晕 米宝 出结果了！结果条带比较杂，但是p-akt还是比较清楚的！另外，出现诡异现象就是，无法解释！糖
体积的 0.5 M EDTA，以终止消化。然后用等体积酚抽提、等体积氯仿抽提，2.5 倍体积乙醇沉淀，少量 TE 溶解（参见 DNA 提取方法，但离心转速要提高到 12000 g，以防止小片段 DNA 的丢失）。如果需要两种酶消化 DNA，而两种酶的反应条件可以一致，则两种酶可同时进行消化；如果反应条件不一致，则先用需要低离子强度的酶消化，然后补加盐类等物质调高反应体系的离子强度，再加第二种酶进行消化。三、 基因组 DNA 消化产物的琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是目前分离核酸片段最常用的方法，制备
酶活性；2. 10×CIP 缓冲液和 1U CIP，混合后，37 ℃ 孵育 30～60 min，然后 75 ℃ 加热 15 min 灭活 CIP 活性；3. 琼脂糖凝胶电泳分离并纯化目的 DNA 片段用于连接反应。（二）连接反应【实验试剂与器材】1. T4 DNA 连接酶2. 10×T4 连接酶缓冲液【实验方法与步骤】反应体系：质粒 DNA (0.5(g/? 滋 l) 2? 滋 lDNA 插入片段 (300ng/? 滋 l) 5? 滋 l10× 连接缓冲液 1? 滋 lT4 DNA 连接酶 1? 滋 l加水
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