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阴凉干燥
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长期
- 英文名:
Tris-Glycine Transfer Buffer(pH8.3, 10×)
- 库存:
517
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)促销的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)促销
编号:WE0311
英文名:Tris-Glycine Transfer Buffer(pH8.3, 10×)
产地:国产|进口
规格:500ml
除Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)促销外,我公司正在打折促销以下产品:
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·口腔拭子基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0179
英文名称:Swab Genomic DNA Extraction Kit
规格:50次|200次
本试剂盒提供一种简单快速分离纯化口腔拭子样本总DNA的方法。该试剂盒采用可特异性结合DNA的硅基质膜和独特的缓冲系统,高效专一吸附DNA,每个拭子可得到0.5-3.5μg基因组DNA,提取的DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠。适用于酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer GR | 25ml | 120ml |
| Buffer GL | 25ml | 120ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml | 52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 75ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| 蛋白酶K | 25mg | 90mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml | 5ml |
| 吸附柱DS及收集管 | 50套 | 200套 |
| 离心管(1.5ml) | 50个 | 200个 |
产品特点:
1、采用硅基质膜原理,简单、快速从口腔拭子中提取基因组DNA。
2、提取的基因组DNA片段大、纯度高。
3、单个拭子样本得率达到0.5-3.5μg。
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/5ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
3、使用前若发现Buffer GL有沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴溶解。
4、全部离心步骤可在室温下进行。
5、取样:使用口腔拭子在口腔内壁擦拭6次,晾干2小时保存,为确保样本不被食物或饮料污染,取样前30分钟内请勿进食和饮水。
操作步骤:
1.将口腔拭子的棉签用剪刀从杆上剪下,置于2ml的离心管(自备)中,加入400μl Buffer GR。
注意:如需无RNA污染的基因组DNA,可加入4μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀。
2.加入20μl 蛋白酶K 和 400μl Buffer GL,立即涡旋震荡15秒,充分混匀。
注意:加入Buffer GL后立即充分混匀;不可将蛋白酶K 直接加入Buffer GL中使用。
3.56℃放置10分钟,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
4.加入400μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:加入无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
5.将上步所得溶液和沉淀分两次加入到已装入收集管的吸附柱中,一次最多不超过700μl 。12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6.向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7.向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心3分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7。
8.12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9.将吸附柱置于一个新的1.5ml离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入50μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)若需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
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文献和实验) 极限低价: 500ul 68元 PCR TaqMix试剂加入了Taq DNA聚合酶、dNTP、反应Buffer、优化剂,浓度为2×,只需加入模板引物即可上机扩增。使用非常方便,具有稳定性好、扩增成功率很高、特异性强等优点,特别适合于难以扩增的PCR及大规模PCR。同时还含有电泳染料,PCR后可直接电泳检测。 产品组成(2×):1 U Taq Polymerase/ml, 500 mM dNTP each, 50 mM Tris-HCl (pH8.7),20 mM KCl, 3 mM MgCl
(pH6.8) 1.5 mol/L Tris•HCl(pH8.8) 10% SDS 10% 过硫酸胺(APS) 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶(分离胶)浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织
NaCl,然后缓慢加入 10 g CTAB (十六烷基三甲基溴化铵),同时加热并搅拌,可加热至 65℃ 溶解,定容终体积至 100 mL。3. CTAB 沉淀液: 1% (w/v) CTAB,50 mM Tris.Cl (pH8.0),10 mM EDTA(pH8.0)4. 高盐 TE 缓冲液: 10 mM Tris.Cl (pH8.0),0.1 mM EDTA (pH8.0),1M NaCl【实验方法与步骤】1. 在所需量的 CTAB 抽提液中加入 2-巯基乙醇,使终浓度达 2% (v/v
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