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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)
- 库存:
821
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)厂商在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)厂商
英文名:Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)
规格:3ml
产地:国产|进口
编号:WE0316
本试剂盒根据生物素与链霉亲和素具有很强亲和力的原理设计。 在兔源或鼠源的一抗与相应的靶抗原结合后,本试剂盒中的生物素化抗兔/鼠通用型二抗与一抗特异结合;二抗上标记的生物素与标记了过氧化物酶(HRP)的链霉亲和素结合,形成抗原~特异性一抗~生物素化的二抗~HRP标记的链霉亲和素复合物。HRP可以催化底物显色,从而推断待检抗原的存在及分布。该试剂盒使用的生物素化二抗、SA-HRP,均采用优化的标记和纯化技术,使得其染色有更高灵敏度和更低的背景,适合于检测福尔马林固定石蜡包埋组织切片,以及冰冻切片、细胞爬片、新鲜制备的血涂片等。兔/鼠通用型Streptavidin-HRP试剂盒适合与百奥莱博即用型或浓缩型抗体配套使用。
试剂盒组成:
| 组份 | 3ml |
| Solution A(Endogenous Peroxydase Enzymes Blocking Buffer,White Solution) | 3ml |
| Solution B(Normal Goat Serum For Blocking,White Solution) | 3ml |
| Solution C(Goat anti-Rabbit/Mouse IgG,Biotin,Ready to Use,Yellow Solution) | 3ml |
| Solution D(Streptavidin-HRP,Ready to Use,Red Solution) | 3ml |
| DAB-A(20×) | 250μl |
| DAB-B(1×) | 5ml |
注意事项:
1、以每张切片加入1滴(约50μl)计算,3ml可做60张切片, 18ml可做360张切片。
2、对于内源性生物素含量比较丰富的组织,使用本试剂盒时最好用内源性生物素阻断剂进行封闭。
3、DAB工作液现配现用,配制好的工作液2~8℃避光1小时内有效。
4、实验过程中避免组织片干燥,因此各步孵育时工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织样本,且尽量在湿盒中进行孵育。
5、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件及试剂用量。
6、DAB为可疑致癌物,使用时请采取必要的防护措施。
7、本产品仅用于科研,不能用于人体反应或人体治疗。
操作步骤:
1、常规处理欲检测的石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等样本。
1)组织切片或细胞爬片染色前处理:
a. 石蜡切片
脱蜡水化:60ºC烤片1小时,二甲*脱蜡二次,每次5分钟;再依次浸入梯度乙醇(无水乙醇-无水乙醇-95%-85%-75%乙醇)和蒸馏水中各5分钟水化。
b. 冰冻切片和细胞爬片
切片(或爬片)浸于0.01 M pH7.4 PBS洗涤3次×5分钟。然后用0.1%Triton X-100覆盖组织(或细胞)浸润15分钟,0.01 M pH7.4 PBS洗涤2次×5分钟。
2)石蜡切片的抗原修复:绝大大多数情况下,石蜡组织切片用柠檬酸缓冲液高压修复都是适合的。
修复工作液配制:1 L去离子水中加入10ml柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液, 100×)(Cat#:WE0318),混匀即可。
修复过程:修复液加入高压锅内,待修复切片浸于修复液中(必需没过组织),盖上压力锅盖,加热至均匀喷汽,从喷汽开始计时,1~2分钟后压力锅离开热源,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水淋洗后,再用PBS(0.01 M pH7.4)漂洗2次,每次3分钟。
2、滴加适量Solution A白色溶液,即内源性过氧化物酶封闭液室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
3、滴加适量Solution B白色溶液,即封闭用正常羊血清工作液,室温孵育10分钟,甩干。
4、滴加适量一抗工作液(商品化即用型抗体或适当比例稀释的浓缩抗体),按实验要求孵育,然后PBS充分淋洗。
5、滴加适量Solution C黄色溶液,即生物素标记羊抗兔/鼠二抗工作液,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
6、滴加适量Solution D红色溶液,即HRP标记的链霉亲和素,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
7、DAB显色工作液配制:根据需要量,将DAB-A和DAB-B以1:19的体积比混匀后即为DAB显色工作液。也可选择每毫升试剂B中滴加1滴(约50μl)试剂A,混匀即可。
8、显色:加适量的DAB显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上即可显色,显色时间一般为1-5分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。
储存条件:2~8℃
关于通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)厂商的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·DNA产物快速纯化试剂盒
编号:WE0170
英文名称:DNA Product Quick Clean-up Kit
规格:50次|200次
本试剂盒采用新型硅基质膜技术和试剂配方,通过离心吸附柱快速简单的结合-洗涤-洗脱三步即可从PCR产物或酶反应液(酶切,连接,探针标记等)中纯化回收100 bp-10 kb的DNA片段,每个吸附柱最高可吸附10μg的DNA,同时最大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等杂质。纯化回收的DNA纯度及浓度高,完整性好,回收率高,可直接用于测序、连接和转化、标记、体外转录等分子生物学实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer PB | 30ml | 120ml |
| Buffer PS | 15ml | 60ml |
| Buffer PW(浓缩) | 6ml | 25ml |
| Buffer EB | 10ml | 30ml |
| 离心吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
产品特点
1、快速简单:操作步骤少,15分钟完成,同时可处理多个样品,节省时间。
2、回收率高:新型硅基质膜技术和试剂配方保证每次最大量回收到纯度极高的目的DNA。
3、处理量大:每个离心吸附柱每次最多可吸附的DNA 量为10μg。
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,更长时间保存可置于2- 8℃。当溶液低温保存时,使用前需在室温中放置一段时间,恢复至室温后使用。
2、本试剂盒可无选择性回收溶液中所有DNA片段,如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,请选择我公司的胶回收试剂盒(WE0168)
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer PB是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀现象,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清。
5、回收效率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少,洗脱体积越少,回收率越低。
6、所有离心步骤均可室温下进行。
操作步骤:
1、估计DNA反应液的体积,加入5倍体积的 Buffer PB,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油)。
注意:
1)如DNA反应体系为50μl(不包括石蜡油体积),则加入250μl Buffer PB。
2)在加入Buffer PB后检测溶液的pH值,若pH值>7.5,可向其中加入10-30μl的3 M醋酸*(pH5.0),从而将pH值调到5-7。
2、柱平衡:向已装入收集管中的吸附柱DM中加入200μl Buffer PS,13000rpm(~~~16200×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
3、将步骤1中所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中,室温放置1分钟,13000rpm离心30-60 s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
注意:吸附柱容积为750μl,若样品体积大于750μl可分批加入 。
4、向吸附柱中加入500μl Buffer PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)13000rpm离心30-60 s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
注意:如果纯化的DNA用于盐敏感实验(例如平末端连接实验或直接测序),建议加入Buffer PW后静置2-5分钟再离心。
5、13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。为确保下游实验不受残留乙醇的影响,建议将吸附柱开盖,置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。
6、将吸附柱放到一个新离心管(自备)中,向吸附膜中间位置悬空滴加30-50μl Buffer EB,室温放置1分钟。13000rpm离心1分钟,收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意:
1)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液,应保证其pH值在7.0-8.5之间(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)。
2)为了提高DNA的回收量,可将离心得到的溶液重新加到吸附柱中,室温放置2分钟,13000rpm离心1分钟。
3)洗脱体积不应小于30μl,体积过少会影响回收效率。
4)回收>10 kb的DNA片段时,Buffer EB应在50℃水浴中预热,适当延长吸附和洗脱时间,可增加回收效率。
储存条件:室温(15~30℃)。
通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)厂商关键词:WE0316,通用型免疫组化试剂盒,鼠兔源一抗,通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗),Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)
·丽春红染色试剂
编号:WE0305
英文名称:Ponceau Stain Reagent
规格:100ml
丽春红为常用蛋白质染色剂。试剂本身带负电荷,既可与带正电荷的*基酸残基相结合,也可与蛋白质非极性区结合,从而在印迹膜上形成清晰的红色条带;同时这种结合具有可逆性,染色后可用蒸馏水、PBS缓冲液或其它适当溶液进行漂洗脱色,对后续实验不产生影响。本产品可用于检测Western Blot实验中PVDF或NC膜上蛋白,以检测蛋白的转膜效率;具有灵敏度高,使用方便等优点。
注意事项:
1、丽春红染色试剂不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。
2、使用本品时,请穿着实验服并佩戴手套进行操作。
3、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、蛋白转移完毕后,将PVDF或NC膜完全浸没在Ponceau Stain Reagent(丽春红染色液)中,摇动染色3-5分钟。
2、使用纯水、PBS缓冲液或其它适当溶液对印迹膜进行漂洗2-3次,每次3-5分钟,去除未与蛋白结合的染料,直至膜上出现清晰条带。
3、检测结束后,再次使用纯水,PBS缓冲液或其它适当溶液对印迹膜进行漂洗2-3次,每次3-5分钟,去除与蛋白结合的丽春红染料。
4、按照正常步骤,进行后续的Western Blot检测。
储存条件:室温
·HRP标记山羊抗人IgA
编号:WE0377
英文名称:Goat Anti-Human IgA(H), HRP Conjugated
规格:100μl
本产品为辣根过氧化物酶标记的经亲和纯化的山羊抗体,特异识别人的IgA重链,与人IgG、IgM无交叉反应,检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,可用于Western Blot、ELISA和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:人IgA
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB(1:2000-10000)
ELISA(1:2000-20000)
Immunohisto/Cytochemistry(1:100-200)
通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)厂商关键词:WE0316,通用型免疫组化试剂盒,鼠兔源一抗,通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗),Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)
甘*酰-脯*酰-对硝基*(代"*")胺对甲*磺酸盐 m-Toluic acid 65094-46-0
ARB13175 小鼠铁蛋白(FE)Elisa方法检测 Mouse ferritin,fe ELISA KIT
BTN130805 单细胞悬浮液 Single Cell Suspension Solution
BOC-D-谷*酰胺 L-Ornithine Ethylester Dihydrochloride 61348-28-5
2,5-二羟基*甲醛 5-Nitrouracil 1194-98-5
ARB10188 人α干扰素(IFN-α)含量检测 Human interferon α,ifn-α ELISA KIT
F050311 小鼠IgM抗体 Mouse IgM
3-*基*硼*(代"酸") Disodiu*(代"m") phenyl phosphate hydrate 30418-59-8
BTN60908 质粒(载体)系列产品 Plasmid(Vector)Series
ARB13214 小鼠流行性腹泻病毒抗体(PEDV)代做ELISA实验
PY02-424 Elek氏培养基 250克
固蓝RR盐 Benzyltrimethylammonium bromide 14726-29-5
CYB162018 兔抗Avidin(卵清亲合素) 0.5ml
PY01-011 干酪素* 250克
L-组*酸甲酯2盐*(代"酸")盐 PEG200 7389-87-9
ARB12534 大鼠透明质酸结合蛋白(HABP)酶免分析 Rat hya]uronate binding protein,habp ELISA KIT
去核酸酶试剂 Trityl chloride resin
牛磺脱氧胆酸* 5-FOA 1180-95-6
HC0298 八道可调半支灭菌移液器
ARB11310 人促肾上皮质激素释放激素(CRH)尿液中含量检测 Human corticotropin releasing hormone,crh ELISA KIT
CYB161074 猴IgG(液体-pH7.2PBS)
BTN120312 末端脱氧核苷转移酶 Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)
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