蛋白银染试剂盒北京现货促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博供应的蛋白银染试剂盒北京现货促销用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多蛋白银染试剂盒等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。

名称：蛋白银染试剂盒北京现货促销
产地：国产|进口
规格：20次
编号：WE0281
  本试剂盒采用高灵敏度的银染染料，可应用于变性胶及非变性胶的蛋白染色，具有目的条带清晰、背景低，操作时间可灵活控制的优点。另外，本试剂盒增加了一步短时敏化作用步骤，可明显降低背景及提升目的条带的亮度。

试剂盒组成：

 

组份	20次
Silver Stain Sensitizer(500×)	2×1ml
Silver Stain Enhancer	3ml
Silver Stain	2×250ml
Silver Stain Developer	4×125ml

注意事项：
1、请提前准备50ml固定液(超纯水：乙醇：冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰醋酸)。
2、操作时请使用去离子水和洁净的玻璃或塑料器皿，须戴一次性手套进行操作。
3、整个银染过程需在摇床上进行，摇床转速约60 rpm左右。
4、需自备乙醇，冰醋酸。

操作步骤：
  以下操作步骤中各溶液的用量以大小为8.5×5.5 cm、厚度为1.0 mm的凝胶为例，以凝胶全部浸没到溶液为准，置于摇床上操作，一般用量25ml。对于大型凝胶，各溶液的使用量需按凝胶体积的比列放大。
  请提前准备好50ml固定液(超纯水：乙醇：冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰醋酸)。
1、水洗：电泳完成后，用超纯水洗胶2次，每次洗涤5分钟。
2、固定：用25ml固定液固定凝胶2次，每次固定15分钟。
3、洗脱：用洗脱液洗胶2次，每次洗涤5分钟。
4、水洗：用超纯水洗胶2次，每次洗涤5分钟。
5、增敏：将上一步洗好的凝胶置于银染增敏工作液中，室温下准确孵育1分钟后用超纯水洗胶3次，每次洗涤20秒。
银染增敏工作液的配制：取50μl Silver Stain Sensitizer(500×)加入到25ml超纯水中，混匀。
6、银染：弃去超纯水，将凝胶置于银染工作液中孵育30分钟。
银染工作液的配制：取25ml Silver Stain加入50μl Silver Stain Enhancer混匀。
7、水洗：用超纯水快速洗胶2次，每次洗涤准确控制为20秒。
8、显影：立即将洗好的凝胶浸没在显影液中，室温孵育2-3分钟，直至蛋白条带显示清晰。
显影液的配制：取25ml Silver Stain Developer加入30μl Silver Stain Enhancer混匀。
注意：显影30秒内，蛋白条带开始显现，继续显影至2-3分钟。若蛋白条带显色较浅，可适当延长显影时间至5分钟及以上。
9、终止：用终止液洗去凝胶上的显影液后，将凝胶浸泡在新的终止液中反应10分钟。

实验图例

BSA蛋白样品经过10%的SDS-PAGE凝胶电泳后银染结果
BSA蛋白分子量约为66 kD，上样量从左到右分别为50ng，10ng，5ng

储存条件：室温。

蛋白银染试剂盒北京现货促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·抗V5标签多克隆抗体
编号：WE0344
英文名称：Anti V5 Rabbit Polyclonal Antibody
规格：20μl|100μl
V5标签是从猿病毒5(SV5)副粘病毒P蛋白和V蛋白中分离得到的由14个*基酸残基组成的多肽(GKPIPNPLLGLDST)。该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的V5标签，不受邻近*基酸组成的影响，可用于检测各种表达载体表达的V5-Tag融合蛋白。

抗体类型：亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原：人工合成多肽
应用范围：WB(1：1000-5000)、ELISA(1：1000-10000)


·抗GFP标签多克隆抗体
编号：WE0347
英文名称：Anti GFP-Tag Rabbit Polyclonal Antibody
规格：100μl
GFP或其突变体EGFP与目的蛋白融合表达常用于检测目的蛋白的表达和分布。该抗体特异识别GFP以及EGFP等一些突变体。

抗体类型：亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原：人工合成多肽
应用范围：WB(1：1000-5000)、ELISA(1：1000-20000)

·一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒(高含量ROX校正染料)
编号：WE0150
英文名称：BaldStar TaqMan One Step RT-qPCR Kit(High ROX)
规格：100次
  本试剂盒是采用探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)进行一步法Real-Time RT-qPCR的专用试剂盒。使用本产品进行Real Time RT-qPCR反应时，逆转录和定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需添加试剂，无需打开管盖，避免了污染的同时提高了实验效率。本产品的检测灵敏度高，荧光信号强，信噪比高，非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。其所包含的特殊缓冲系统能使逆转录酶与DNA聚合酶同时发挥最大功效，提高反应效率。使用本产品可以得到更宽广的线性范围，对目的基因定量更准确，重复性好，可信度高。

  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器:(WE0148)
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器：(WE0149)
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器：(WE0150)
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

试剂盒组成：

组份	WE0148-100次	WE0149-100次	WE0150-100次
2×BaldStar TaqMan One Step Buffer	1.4ml	1.4ml	1.4ml
BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix	100μl	100μl	100μl
50×Low ROX	-	50μl	-
50×High ROX	-	-	50μl
RNase-Free Water	1.5ml	1.5ml	1.5ml

注意事项：
1、本试剂盒中试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品以RNA为模板进行一步法RT-PCR实验，在操作过程中应避免RNase污染，建议在专门的区域进行RNA操作，使用专门的仪器和耗材，操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套，实验相关耗材应用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时,并高压灭菌30分钟后使用。
3、本试剂盒中的各试剂应尽量避免反复冻融，反复冻融可能使产品性能下降。
4、本试剂盒必须使用特异性引物，引物的选择可根据具体实验来选择，引物设计的好坏直接影响到RT-qPCR反应的结果，设计引物时需考虑GC含量，引物长度，引物位置，PCR产物的二级结构等因素，建议采用专业的引物设计软件进行设计。
5、本试剂盒推荐使用特异性探针，建议采用专业的设计软件进行设计。


使用方法：
以下举例为常规的反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小的不同进行相应的改进和优化。(反应液的配置请在冰上进行)

1、将RNA模板、引物、2×BaldStar TaqMan One Step Buffer、BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。
2、PCR反应体系：
 

试剂	25μl反应体系	终浓度
2×BaldStar TaqMan One Step Buffer	12.5μl	1×
Forward Primer，10μM	0.5μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	0.5μl	0.2μM
Probe，10μM	0.5μl	0.2μM
BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix	1.0μl
RNA Template	Xμl	10 pg～100ng
50×Low ROX or High ROX(可选)	0.5μl	1×
RNase-Free Water	up to 25μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常RNA模板的量以10 pg – 100ng为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50×Low ROX or 50×High ROX。

3、混匀，短暂离心，将溶液收集到管底。
4、RT-PCR反应条件：
 

步骤	温度	时间	循环数
逆转录	45℃	10 min
PCR预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	30-40个循环
退火/延伸	60℃	45 s

注意：
1)1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、5-10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。

储存条件：-20℃，避免反复冻融


蛋白银染试剂盒北京现货促销关键词：WE0281,蛋白银染试剂盒,Protein Silver Stain Kit

PY08-083  胰酪胨大豆琼脂平板 9CM  10皿/盒，用于药品中抑菌剂效力测定
ARB11188 人降*素(CT)免费代测 Human calcitonin,ct ELISA KIT
ARB13174 小鼠致癌基因相关蛋白KC酶联免疫定量检测 Mouse kc ELISA KIT
人纤溶酶 Sinapic acid 9001-90-5
PBS缓冲液 Zein
ARB13420 鸡α葡萄糖苷酶(A-Glu)elisa检测说明书 Chicken α-glucosidase,a-glu ELISA KIT
ARB10321 人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA检测服务 Human endo*(代"c")rine gland vascular endothelial growth factor,eg-vegf ELISA KIT
*甲*(代"酚")紫 5-Aminovaleric acid 115-40-2
5141-20-8 亮绿 Light Green
F050308 小鼠IgG2a抗体 Mouse IgG2a
ARB11368 人前列腺素D合成酶(PGDS)elisa测定使用说明书 Human prostaglandin d synthase,pgds ELISA KIT
BL1089 无支原体超级新生牛血清
ARB11673 人维生素E(VE)含量检测 Human vitamin e,ve eELISA KIT
HC0052 (带刻度)袋装吸头
BTN130580 小鼠抗GFP标签单抗 Anti GFP-Tag Mouse Mab
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·酵母基因组DNA提取试剂盒
编号：WE0181
英文名称：Yeast Genomic DNA Extraction Kit
规格：50次
  本试剂盒适用于从酵母样品中提取高纯度的总DNA，本品无需使用*酚、*仿等有机溶剂抽提，可获得最大为50 kb的DNA，同时对100 bp的DNA片段也能有效的回收。本试剂盒采用优化的缓冲液体系使裂解液中的DNA高效结合在硅胶膜上，而其他污染物可流过膜，使用低盐缓冲液或水洗脱，即可获得高纯度的DNA。提取的DNA可直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。

试剂盒组成：

组份	50次
Buffer GTL	15ml
Buffer GL	15ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml
Buffer GE	15ml
蛋白酶K	25 mg
蛋白酶K 储存液	1.25ml
Lyticase Working Buffer	30ml
Lyticase	300μl
Glass Beads	2g
吸附柱DM及收集管	50套

保存条件：Lyticase -20℃，其他组分室温(15～30℃)。

自备试剂：无水乙醇，β-巯基乙醇。

产品特点
1、适用于从酵母样品中分离纯化高纯度总DNA。
2、无需有机溶剂提取以及乙醇沉淀，彻底去除污染物及下游反应抑制物，快速提取高品质DNA。
3、Lyticase酶与玻璃珠共同作用，有效破除酵母细胞壁。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。对于有些细胞壁较厚以及在培养阶段会产生大量代谢物的酵母，建议在生长早期收集样品。
3、Lyticase Working Buffer在使用前请加入β-巯基乙醇，使其终浓度为0.1%。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GTL和Buffer GL于65℃水浴重新溶解。
6、如果下游实验对RNA污染比较敏感，可以在加入Buffer GL前加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225S。

操作步骤：
1、取1-5ml酵母培养物(最多不超过5×107个细胞，一般对于酿酒酵母OD600=1.0时，相当于1-2×107细胞/ml)，12000rpm(～13400×g)离心1分钟，收集菌体沉淀，尽量吸弃上清。
注意：菌液较多时，可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中。
2、酵母细胞壁的去除：向菌体中加入600μl Lyticase Working Buffer(使用前检查是否加入β-巯基乙醇，使其终浓度为0.1%)，并加入5μl Lyticase，充分混匀。30℃处理30分钟。4000rpm(~1,500×g)离心10分钟，弃上清，收集沉淀。
注意：以上为5×107酵母细胞Lyticase用量，根据酵母的菌株和酵母细胞数量的不同，所用的Lyticase的浓度和孵育时间应该进行适当调整。
3、向沉淀中加入200μl Buffer GTL，加入40 mg玻璃珠(Glass Beads)，涡旋5分钟。
4、加入20μl 蛋白酶K 混匀。55℃振荡水浴至细胞完全裂解。若无振荡水浴箱，温育期间每20-30分钟颠倒混匀一次。(一般不超过1小时细胞即可完全裂解)。
注意：如需去除RNA，在上述步骤完成后加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(货号：WE0225S)，震荡混匀，室温放置5-10分钟。
5、12000rpm离心5分钟，小心吸取上清至新离心管中。
6、加入200μl Buffer GL，充分混匀。70℃孵育10分钟，其间颠倒混匀数次，12000rpm离心5分钟，将上清移到一个新的离心管中。
注意：若孵育后溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取的DNA不纯。
7、加入200μl无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀。短暂离心，使管壁和管盖上的液体集中到管底。
8、将步骤7所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤10。
11、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟以彻底晾干。
12、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤10；若洗脱体积小于200μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

储存条件：室温(15～30℃)。

我公司生产供应销*(代"售")的蛋白质研究产品正全系列现货促销，满分期待您的垂询选购蛋白银染试剂盒北京现货促销。