真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式)价格

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式)价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式)价格
规格：50T/200T
编号：XH007
品牌：百奥莱博
原理简介
真菌是具有真核和细胞壁的异养生物。种属很多，已报道的属达1万以上，种超过10万个。真菌通常又分为三类，即酵母菌、霉菌和蕈菌（大型真菌）。对于酵母菌和霉菌，可以用玻璃珠处理，而对于大型真菌，可直接用液液氮研磨。经过前期处理的菌液，再经过裂解液及蛋白酶处理后，玻璃奶吸附DNA，去掉其他杂质，，可得到高纯度的基因组。提取纯化后的DNA，可以直接用于 PCR/Real time-PCR，sequencing，Southern blot，mutant analysis，SNP 等下游应用实验。
注意事项
1．由于真菌种类万千，对于一些特别难处理的真菌，可用液氮研磨，再用玻璃珠振荡，蛋白酶K处理，一般都可以得到一定量的基因组DNA，如电泳检测很弱，一般PCR都会有较好结果。
2．如果DNA提取量很少，可加长玻璃珠处理时间，如果提取DNA片段很短，成弥散条带，可减少玻璃珠处理时间。
操作步骤
1．样品的处理：
1）对于酵母菌，取1-2ml培养好的菌液，离心收集，弃上清。加入300ul 裂解液，加入10ul RNase A，再加入100mg玻璃珠，在高速振荡器上振荡，约5-10min。
2）霉素(孢子也可相同处理)：取50-100mg菌丝，加300ul裂解液，用玻璃研磨器适当研磨分散菌丝，加入10ul RNase A，再加入100mg玻璃珠，在高速振荡器上振荡，约30min。
3）大型真菌（如蘑菇等）：称取50-100mg样品，倒入适量的液氮，立即研磨重复3 次，使样品研成粉末（如无液氮，可加300ul裂解液后用玻璃研磨器适当研磨），加300ul裂解液，加入10ul RNase A，再加入100mg玻璃珠，在高速振荡器上振荡，约5min。
2．加入10ul 10mg/ml的蛋白酶K，充分混匀，55℃水浴消化，15－30min。消化期间可颠倒离心管混匀数次。
3．12000转离心2min。将上清转移到一个新的离心管中。如有沉淀，可再次离心。
4．在上清中加入三倍体积无水乙醇，充分混匀。
5．12000rpm离心5分钟，去上清，核酸在沉淀中。
6．沉淀中加入500ul结合液，55℃水浴1-2分钟，核酸沉淀可溶解。
6．玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶，混匀，室温放置2分钟，10000转/分钟离心1分钟，去上清；沉淀加入1ml 70%乙醇，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，70%乙醇重复洗一次，再用无水乙醇洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清。
7．室温放置10分钟（如果玻璃奶加量，请适当延长放置时间，此步为去除残余酒精，以免影响下游实验），加入50－100ul TE缓冲液混匀溶解，55℃水浴5分钟。离心，取上清为所提基因组。
8．电泳或者其他方法检测，进入下游实验。

我公司的真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式)价格，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·HB101受体菌
编号：XH047
规格：1ml
基因型：F-，supE44，hsdS20(rB－mB－)，recA13，ara-14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1
细胞种类
高效常用宿主菌E.coli HB101
E.coli HB101在基因重组实验起始时便十分常用。遗传性能稳定，使用十分方便，适合于各种基因重组实验。
保存：所有受体菌均为甘油保存，-70℃可长期保存，-20℃可保存一年。

·4×SDS-PAGE分离胶缓冲液
编号：XH081
规格：100ml/500ml
4×SDS-PAGE分离胶缓冲液（PH=8.8）
含 1.5MTRIS-HCl PH8.8 0.4% SDS
如配制10ml分离胶，可加入此试剂2.5ml，不必再加5MTRIS-HCl 和SDS。

·SDS-PAGE蛋白电泳套装
编号：XH061
规格：50T
产品简介
本公司提供的蛋白电泳套装包含凝胶制备，蛋白上样缓冲液及蛋白电泳上样缓冲液。
本公司生产的SDS-PAGE蛋白电泳套装是按照经典方法配制而成。本套装根据电泳体系的大小，可进行约50次左右。
使用说明：
一，前期工作：蛋白提取及定量。
二，蛋白上样液的制备：蛋白上样缓冲液解冻，轻轻混匀，按4体积蛋白样品加入一体积的5×蛋白上样缓冲液，混匀，沸水中水浴5分钟。
三，电泳液的配制：将一包电泳液干粉全部倒入1L－2L的烧柄中，加一定量的水溶解成2L配成5×Tris-甘*酸蛋白电泳缓冲液，用前再稀释5倍或者先配成1L成为10×Tris-甘*酸蛋白电泳缓冲液，用前再稀释10倍。
四，取10-15支1.5ml离心管，将过硫*(代"酸")铵干粉分装成100mg/支，标记好备用。
五，凝胶制备：
1， 取一支称好的100mg过硫*(代"酸")铵干粉，加入1ml蒸馏水，混匀，此配好的10%过硫*(代"酸")铵溶液2－8度可保存一周，一周后请用新的。洗干净电泳玻璃板，夹好。
2， 根据目标蛋白分子量大小，选取凝胶浓度，按下表配制。先配分离胶，再配浓缩胶。
注意：
1，TEMED和10%过硫*(代"酸")铵最后加，在加入前需混匀前面所加试剂。10%过硫*(代"酸")铵在4℃有效期为一周，TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖。在常温下胶30分钟内可以凝固，如温度过低，可放37℃温箱凝固。灌完分离胶后，轻轻的加1ml ddH2O封上层，胶凝固后可见到分界线。灌浓缩胶前，先倾去水层，再用吸纸吸干。浓缩胶灌好后立刻插入梳子。浓缩胶凝固后，放入电泳液中(让电泳液漫过加样孔)，轻轻的拨出梳子，可防加样孔变形。
2，配制量可按上表等比加减。如果所用胶浓度与上面不同，可自行调整，主要是调整30%丙*(代"烯")酰胺的量（需要浓度×总体积/30%），最后用水补足总体积。
六，上样，电泳，一般是浓缩胶80V，分离胶120V恒压，等*酚兰电泳到合适的位置，结束电泳，染色或者进行下一步实验。


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·线粒体提取试剂盒
编号：XH058
规格：50T/100T
二，说明
线粒体提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于动物软组织（肝或脑组织）和硬组织（肌肉）以及培养细胞的线粒体的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。
三，操作步骤
1. 样本处理
a. 组织匀浆：称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer，0℃冰浴上下研磨组织20次；
b. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800 × g 5~10 min离心收集细胞。计数。每次提取需要5 × 107个细胞，加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨30~40次；
2. 将组织或细胞匀浆物转移到离心管，4℃，1000× g 离心5 min；
3. 取上清，加入一新的离心管中，4℃，1000× g 再次离心5 min。
4．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 12,000 × g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底；
5. 在线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀，4℃，1000× g 离心5 min；
6．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 12,000 × g 离心10 min。弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底；
6. 用50 -100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或-70℃保存。
四 注意事项：
1. 为保证获得完整的线粒体，第一是全程低温操作。第二是快速。第三，在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞是制备线粒体的最关键环节。与组织块相比，培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁，因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。
2. 以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。
3. 进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入上样缓冲液裂解线粒体。
五 储存：四周内使用可4℃储存，长期置-20℃
转速与离心力换算
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]２
G为离心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍数来表示；
[rpm] ２即：转速的平方； R为半径，单位为厘米。


真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式)价格关键词：真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式),百奥莱博,XH007


·载体两性电解质PH6-8
编号：XH068
规格：12ml
别名：两性电解质两性电解质载体(PH6-8)：Ampholyte solution、Ampholine。
性状；近无色至浅黄色透明液体，有粘性，为一中相对分子质量300-1000的人工合成的多*基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。
溶度：为40％的溶液
用途：用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳
储存：充氮密封4℃保存。保持期，两年。开启后请尽快用完。

·动物基因组DNA提取试剂盒
编号：XH010
规格：50T/200T
原理简介
本试剂盒适用于动物组织及培养的细胞样本，用于从中提取基因组DNA。对于尾，骨等可用，但提取效果一般。独特的裂解缓冲液加上蛋白酶K等迅速去掉除DNA外的其他物质，并利用玻璃奶吸附DNA，进一步的去掉其他杂质，提取出来，得到的DNA可用于PCR/Real time-PCR，sequencing，Southern blot，mutant analysis，SNP 等下游应用实验。
注意事项
1．裂解液低温时可能出现析出和沉淀，可以在热水中温浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2．避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
3．RNaseA经常使用可放2－8度保存，蛋白酶K请放－20度保存。
4．同一样本，如果想大量提取，可以增加样本量，并且每一步试剂加量，但使用次数会成倍减少。
操作步骤
1．取不超过108个细胞），12,000rpm，离心30秒，尽可能的吸净上清。如果是组织，可用液氮研磨或者尽可能的剪碎，取不超过20mg，放入离心管中。
2．加入250ul裂解液，立即震荡混匀，可选做步骤：如需要去除RNA，可以加入10μl RNase A(10mg/ml)溶液，振荡混匀，室温放置5-10分钟。
3．加入10μl蛋白酶K(10mg/ml)溶液，颠倒混匀，65℃放置10－30分钟，期间颠倒3－5次，小心内心管盖受热开启。如30分钟沉淀无法完全消失，请注意第6步处理。
4，在上清中加入三倍体积无水乙醇，充分混匀。
5．12000rpm离心5分钟，吸去上清，核酸在沉淀中。
6．沉淀中加入500ul结合液，65℃水浴1-2分钟，核酸沉淀可溶解（如无法完全溶解，可转移上清到一新的离心管中，弃沉淀）。
6．玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶，混匀，室温放置2分钟，10000转/分钟离心1分钟，去上清；沉淀加入1ml 70%乙醇，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，70%乙醇重复洗一次，再用无水乙醇洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清。
7．室温放置10分钟（如果玻璃奶加量，请适当延长放置时间，此步为去除残余酒精，以免影响下游实验），加入50－100ul TE缓冲液混匀溶解，65℃水浴5分钟。离心，取上清为所提基因组。
8．电泳或者其他方法检测，进入下游实验。

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