北京SABC(兔IgG)-FITC免疫组化试剂盒多少钱

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名称：北京SABC(兔IgG)-FITC免疫组化试剂盒多少钱
编号：XH113
规格：100T
品牌：百奥莱博
试剂盒组成:
1， 封闭液：10ml，5%BSA
2， 生物素化羊抗兔：浓缩液100ul。
3， SABC-FITC:浓缩液100ul。
4， 稀释液：30ml。
5， 抗荧光衰减封片剂

试剂盒简介：
本试剂盒适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验. FITC显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（IP=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂：
1．粘片剂多聚赖*酸。
2． 0.01 M PBS（pH7.2-7.4）
3． 0.01M柠檬酸*缓冲液
4、抗荧光衰减封片剂
实验步骤:
以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。
2．热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液（PH6.0）,电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS（pH7.2-7.6）洗涤1-2次。
3．滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
4．用稀释液将一抗（如兔抗IL-10）按一定比例稀释（稀释后的一抗4℃可保存一周），也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗，37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。）
5．根据使用量,用稀释液将生物素化羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。
6．根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液，混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃，30分钟(避光)。PBS（pH7.2-7.4）洗5分钟×4次。
7．滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。

注意事项：如果染色背景过高，在SABC反应之后，用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST（pH7.2-7.4）洗涤切片4次，PBS洗2次，然后封片观察。

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·酵母蛋白小量提取试剂盒
编号：XH060
规格：50T/100T
二，说明
酵母蛋白小量提取试剂盒用于从酵母细胞中分提取可溶性各种蛋白。提取的蛋白可用于各种常规实验。如PAGE，Western，免疫沉淀(immunol precipitation，IP)和免疫共沉淀(co-IP)。酵母裂解液中不含任何去污剂，可用各种方法测定蛋白含量。
三，操作步骤
酵母常规培养。
离心收集酵母。大概50－100ul的积压体积。完全弃上清。
加入酵母裂解液，吹打重重悬。再次离心，弃上清（此步的目的是将酵母洗一下，也可以省掉此步）。
在酵母菌中，再加入0.5ml裂解液，加入5ul PMSF，5ulβ-巯基乙醇（最好在通风处操作）。加入50mg左右的玻璃珠，预冷，涡流10min（每涡流1min，可以冰上冷却1min）。
离心，取上清。进行下一步实验或者-70℃储存。

三，注意事项
1，不同的酵母可能须涡流时间不同，可根据实际情况延长或者缩短时间。（比如蛋白浓度高低，蛋白降解情况等。）
2，如果一个月内能够用完，可将β-巯基乙醇按照百分之一的量一次性全部加入酵母裂解液中。2－8度保存。
3，因为是采用物理方法破解酵母壁，所以对于酶等一些易失活蛋白可能并不适合。
4，为了你的实验安全，请戴手套操作。并注意通风。

·5×蛋白上样缓冲液（配有β-巯基乙醇）
编号：XH056
规格：10ml
产品简介：
本产品适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS，β-巯基乙醇，*酚蓝，缓冲盐溶液等。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质－SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异，SDS还可以断开分子内和分子间的*键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构，β-巯基乙醇可以断开半胱*酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质的四级结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。*酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。
保存时间：
未混合前2-8℃可保存一年，混合后保存三个月。
使用说明：
1． 根据用量，以每1ml的5×蛋白上样缓冲液加入50ulβ-巯基乙醇，混匀。此即为配好的蛋白上样缓冲液。此配好的蛋白上样缓冲液在2-8℃保存三个月。
2． 请按每40微升蛋白样品加入10ul配好的上样缓冲液的比例来使用。如果蛋白浓度过高，可用双蒸水稀释。
3． 混匀后，100℃水浴加热3-5分钟，使蛋白变性。
4． 冷却到室温后，离心数秒后，混均再离心30秒取上清直接上样即可。
注意事项：
β-巯基乙醇味道特别难受，所有操作最好是在通风柜中操作。如果没有通风柜，也尽量找一通风处操作，或者使用5×蛋白上样缓冲液（含DTT）。
8%胶时*酚蓝大概在30kd左右， 12%胶时，约在20kd左右，15%胶时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


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·羊抗猪IgG（纯化抗体）
编号：XH092
规格：1mg/10mg
先以A蛋白纯化免疫球蛋白猪IgG，用此猪IgG免疫山羊，经过多次免疫后，测得山羊血清的效价达到要求后，动脉一次取血，静置得到血清，血清采用DEAE离子交换吸掉杂蛋白，再用硫*(代"酸")铵沉淀，透析，定量等进一步处理得到纯化羊抗猪IgG抗体，此纯化抗体可以用于标记，免疫沉淀，ELISA等常规免疫学实验。
如果客户对抗体纯度要求更高，本公司可以定做免疫亲和纯化的抗体，以猪IgG结合在树脂上，吸附全部有活性的抗体，这样得到的抗体纯度更高，当然，成本也更高。

·动物基因组DNA提取试剂盒
编号：XH010
规格：50T/200T
原理简介
本试剂盒适用于动物组织及培养的细胞样本，用于从中提取基因组DNA。对于尾，骨等可用，但提取效果一般。独特的裂解缓冲液加上蛋白酶K等迅速去掉除DNA外的其他物质，并利用玻璃奶吸附DNA，进一步的去掉其他杂质，提取出来，得到的DNA可用于PCR/Real time-PCR，sequencing，Southern blot，mutant analysis，SNP 等下游应用实验。
注意事项
1．裂解液低温时可能出现析出和沉淀，可以在热水中温浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2．避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
3．RNaseA经常使用可放2－8度保存，蛋白酶K请放－20度保存。
4．同一样本，如果想大量提取，可以增加样本量，并且每一步试剂加量，但使用次数会成倍减少。
操作步骤
1．取不超过108个细胞），12,000rpm，离心30秒，尽可能的吸净上清。如果是组织，可用液氮研磨或者尽可能的剪碎，取不超过20mg，放入离心管中。
2．加入250ul裂解液，立即震荡混匀，可选做步骤：如需要去除RNA，可以加入10μl RNase A(10mg/ml)溶液，振荡混匀，室温放置5-10分钟。
3．加入10μl蛋白酶K(10mg/ml)溶液，颠倒混匀，65℃放置10－30分钟，期间颠倒3－5次，小心内心管盖受热开启。如30分钟沉淀无法完全消失，请注意第6步处理。
4，在上清中加入三倍体积无水乙醇，充分混匀。
5．12000rpm离心5分钟，吸去上清，核酸在沉淀中。
6．沉淀中加入500ul结合液，65℃水浴1-2分钟，核酸沉淀可溶解（如无法完全溶解，可转移上清到一新的离心管中，弃沉淀）。
6．玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶，混匀，室温放置2分钟，10000转/分钟离心1分钟，去上清；沉淀加入1ml 70%乙醇，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，70%乙醇重复洗一次，再用无水乙醇洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清。
7．室温放置10分钟（如果玻璃奶加量，请适当延长放置时间，此步为去除残余酒精，以免影响下游实验），加入50－100ul TE缓冲液混匀溶解，65℃水浴5分钟。离心，取上清为所提基因组。
8．电泳或者其他方法检测，进入下游实验。


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