SABC(小鼠IgG)-POD免疫组化试剂盒促销

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北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖SABC(小鼠IgG)-POD免疫组化试剂盒促销在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：SABC(小鼠IgG)-POD免疫组化试剂盒促销
产地：国产|进口
规格：100T
品牌：百奥莱博
试剂盒组成:
1， 封闭液：10ml，5%BSA
2， Bio-羊抗小鼠IgG：浓缩液100ul。
3， SABC-POD:浓缩液100ul。
4， 稀释液：30ml。
5， 显色液:20×DAB显色液A,20×DAB显色液B
试剂盒简介：
本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG的免疫组化实验. DAB显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（IP=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂：
1．粘片剂多聚赖*酸
2． 0.01 M PBS（pH7.2-7.4）
3． 0.01M柠檬酸*缓冲液
4、苏木素
实验步骤:
以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3．可选步聚：a、热修复抗原，将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液（PH6.0）,电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS（pH7.2-7.6）洗涤1-2次。b、酶消化，滴加消化液，37度10分钟， PBS（pH7.2-7.6）洗涤2-3次。c、不处理，直接进入下一步。
4． 滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
5．用稀释液将一抗（如小鼠抗IL-10）按一定比例稀释（稀释后的一抗4℃可保存一周），也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗，37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。）
6．根据使用量,用稀释液将Bio-羊抗小鼠浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗小鼠IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗小鼠IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。
7．根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液，混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃，30分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗5分钟×4次。
8．DAB显色:根据用量，用PBS（pH7.2-7.4）配制，按1mlPBS加入50ul 20×DAB显色液A，加入50ul 20×DAB显色液B 。混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间，一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9．苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。

对于细胞片，常规固定后，PBS漂洗两次，再用0.5%Txiton X-100室温20分钟，PBS漂洗两次，3%H2O2处理15分钟；PBS漂洗两次，下接上面第4步。

对于冰冻切片，固定后，可用PBS漂洗两次，再接上面第二步。

注意事项：如果染色背景过高，在SABC反应之后，DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST（pH7.2-7.4）洗涤切片4次，PBS洗2次，然后DAB显色。

因为免疫组化指标众多，标本不一，此步骤仅作参考。

关于SABC(小鼠IgG)-POD免疫组化试剂盒促销的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·SYBR Green I(10000×)电泳用
编号：XH019
规格：100ul
SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染料，适用于各种电泳分析，操作简单：无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I 与dsDNA结合荧光信号会增强800-1000倍，用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强，背景信号低。可适用于多种电泳分析。
SYBR Green I适合于多种凝胶电泳方法：琼脂糖凝胶，聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳，脉冲电场凝胶电泳，和毛细管电泳等。
SYBR Green I与双链DNA的亲和力非常高，因此可以用做电泳前染色，对分子生物学中常用的酶（如：Taq酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等）没有抑制作用。另外，SYBR Green I与EB相比，诱变能力大大降低。
SYBR Green I核酸染料特点
高灵敏：至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。
信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
操作简单：无须脱色或冲洗。
适用范围广：可适用于多种电泳分析。
使用方便：不影响其它修饰酶作用。
安全性高：分子克隆上明确诱变能力很低
使用方法
SYBR Green I预染方法
1. 该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳
2. 工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的SYBR GreenⅠ稀释100倍，即为SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
3. 制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。
4. 样品染色：向分析样品中加入SYBR GreenⅠ工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。SYBR GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。
5. DNA Marker染色：将5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工作液混匀，室温放置5分钟，使SYBR GreenⅠ与DNA充分结合。（商品Marker最好稀释2-5倍后再电泳，否则电泳条带会变形，特别是大片段。）
6. 上样、电泳：按常规操作。
SYBR Green I后染方法
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用PH=7.0-8.5的缓冲液（如：TAE，TBE或TE），按照10000：1的比例稀释SYBR GreenⅠ浓缩液，混匀，制成染色溶液。
3. 将染色溶液倒入合适的聚丙*(代"烯")容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上，让工作液均匀地覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）。
4. 用紫外仪观测。
SYBR Green I使用注意事项
1. 在"SYBR GreenⅠ预染色方法"中，电泳时间不要超过2小时，否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来，会产生弥散状条带。
2. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中，SYBR Green I可以全部从双链核酸上去掉。
3. 如果想对用 SYBR Green I 染过的胶进行Southern blots，建议在预杂化和杂化溶液中加入0.1%- 0.3%的SDS。
4. 在紫外照射透视下，与双链DNA接合的SYBR Green I呈现绿色荧光。如果胶中含有单链DNA则颜色为橘黄而不是绿色。
5. SYBR Green对玻璃和非聚丙*(代"烯")材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙*(代"烯")类容器。


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·pET-32a(+)
编号：XH044
规格：25ug(0.5OD)
载体类型：大肠杆菌表达载体
载体大小： 5900 bp
载体宿主：大肠杆菌（E.coli）
细菌抗性：*苄青霉素（Amp）
5" 测序引物：S Tag primer
3" 测序引物：T7 terminator primer
载体简介：
The pET-32 series is designed for cloning and high-level expression of peptide sequences fusedwith the 109aa Trx Tag thioredoxin protein . Cloning sites are available for producing fusionproteins also containing cleavable His Tag and S Tag sequences for detection and puri cation.Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circle map. The cloning/expression regionof the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented
so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corre-sponds to the coding strand. Therefore, single-stranded sequencing should be performed using theT7 terminator primer.


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·载体两性电解质PH5-8
编号：XH070
规格：12ml
别名：两性电解质两性电解质载体(PH5-8)：Ampholyte solution、Ampholine。
性状；近无色至浅黄色透明液体，有粘性，为一中相对分子质量300-1000的人工合成的多*基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。
溶度：为40％的溶液
用途：用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳
储存：充氮密封4℃保存。保持期，两年。开启后请尽快用完。

·羊抗小鼠IgG（纯化抗体）
编号：XH093
规格：1mg/10mg
先以A蛋白纯化免疫球蛋白小鼠IgG，用此小鼠IgG免疫山羊，经过多次免疫后，测得山羊血清的效价达到要求后，动脉一次取血，静置得到血清，血清采用DEAE离子交换吸掉杂蛋白，再用硫*(代"酸")铵沉淀，透析，定量等进一步处理得到纯化羊抗小鼠IgG抗体，此纯化抗体可以用于标记，免疫沉淀，ELISA等常规免疫学实验。
如果客户对抗体纯度要求更高，本公司可以定做免疫亲和纯化的抗体，以小鼠IgG结合在树脂上，吸附全部有活性的抗体，这样得到的抗体纯度更高，当然，成本也更高。

·IPTG溶液(200mg/ml)
编号：XH040
规格：1ml/5ml
此产品为IPTG用双蒸水溶解过滤后配成的溶液。
使用方法(解冻后请混匀)：
蓝白色筛选：在100 ml的琼脂培养基中，加入200μl的上述溶液、40 μl的IPTG（200mg/ml）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基（实际上X-gal和IPTG可以直接涂抹在平板培养基表面，干半小时后就可以用，90mM的平板，X-gal(20mg/ml)涂40ul，IPTG涂7ul。150mm的板加倍）。可根据长出菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色为具有DNA插入片段的基因重组体）。
蛋白表达：200mg/ml浓度为840mM。如果终浓度要求为0.5mM，则每升培养基中加入595ul IPTG 溶液 (200mg/ml)。如果加入的是其他浓度，请自己计算。
储存条件：-20℃避光。

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