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长期
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858
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶DNA回收试剂盒促销用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多聚丙*(代"烯")酰胺凝胶DNA回收试剂盒等分子生物学试剂产品请联系我司咨询订购。
名称:聚丙*(代"烯")酰胺凝胶DNA回收试剂盒促销
规格:20T/50T
品牌:百奥莱博
编号:XH052
产地:国产|进口
本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从聚丙*(代"烯")酰胺凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛
选、连接和转化等实验。配以特制的研磨杵和过滤柱,使你的操作更方便。
操作步骤:(所有离心步骤均可使用台式离心机在室温下离心)
第一次使用前请先在15ml漂洗液中加入60ml无水乙醇。
1、将单一的目的DNA条带从聚丙*(代"烯")酰胺凝胶中切下(尽量切除多余部分),放入1.5ml离心管中,称取重量,用研磨杵将胶尽量挤压碎。加入2倍体积的溶胶液吹打混匀(每100mg胶加入200ul溶胶液),75℃水浴30分钟。
2、用1ml的去尖吸头吸取混合物至过滤柱中(将胶一起吸入,溶液过多时可分次加入)。13,000rpm离心1分钟。将收集管中的滤出液转入新离心管。
3、取六倍体积结合液加入原离心管(每100mg胶加入600ul),清洗管壁后加入过滤柱中(溶液过多时可分次加入),颠倒过滤柱或轻轻吹打几次混匀,13,000rpm离心1分钟。将两次收集的滤出液混合。
4、将总滤出液混匀后加入吸附柱中(溶液过多时可分次加入),13,000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。
5、向吸附柱中加入600μl漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),13,000rpm离心30-60秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。
6、向吸附柱中加入600μl漂洗液,13,000rpm离心30-60秒,倒掉废液。
7、将离心吸附柱放回收集管中,13,000rpm离心2分钟,尽量除去漂
洗液。将吸附柱开盖置于室温3-5分钟,彻底晾干,以防止残留的漂洗液影响下一步的实验。
8、将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量65–70℃预热的洗脱缓冲液(20-30μl),室温放置2分钟。13,000rpm离心2分钟收集DNA溶液。
注意:①为了增加回收效率,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,13,000rpm再次离心1分钟。
②洗脱缓冲液体积不应少于20μl,体积过小影响回收效率。
③洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5之间。
9、DNA回收产物直接下一步实验或者-20℃保存。
注意事项:
1、电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
3、本试剂盒对<50bpDNA片段回收效率偏低(30%左右),如想回
收,应加大结合液的体积,延长吸附和洗脱的时间。
4、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越
小,回收率越低。
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聚丙*(代"烯")酰胺凝胶DNA回收试剂盒促销关键词:百奥莱博,XH052,聚丙*(代"烯")酰胺凝胶DNA回收试剂盒
·土壤基因组DNA提取试剂盒
编号:XH018
规格:50T/200T
储存条件:15~25℃,有效期一年。
产品简介:
本试剂盒采用独特的缓冲液,尽可能的去除腐殖酸。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。
使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
操作步骤:
1,称取土壤样本0.1-0.3g于离心管(强烈建议2ml圆底离心管),加入450ul溶液Ⅰ剧烈震荡混匀1-2min至看不到较大固体块。
2,加入50ul溶液Ⅱ颠倒混匀,65℃水浴5min,每2min混匀一次。
3,加入100ul溶液Ⅲ颠倒混匀,室温12000rpm离心10min。
4,取上清,在上清中加入5ul核酸助沉剂,再加入三倍体积无水乙醇,充分混匀。
4、12000rpm离心5min,弃上清,沉淀加入1ml 70%乙醇,轻轻混匀,再次12000rpm离心5min,弃上清,将离心管在离心机中再次离心30S左右,吸去底部少量液体。
5、 室温放置2min左右,等沉淀边缘微微发白,加入50-100ulTE缓冲液溶解,如很难溶解,可55℃水浴5分钟。
6、电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
因为土质千差万别,得到的DNA含量也是相差很大,如果电泳无法检测,可用PCR检测。
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文献和实验琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯化核酸和蛋白质片断的标准方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳片段的回收将在以后的文章中介绍,在这里我先介绍一下琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法,方便大家学习交流。从琼脂糖凝胶中回收DNA,是一种简单不过的常规实验操作。但是由于胶回收的质量和数量直接影响后继的一系列实验――比如酶切连接、转化筛选、测序或者PCR扩增、标记乃至显微注射等等,所以这一步的操作也显得非常重要。胶回收的质量好否直接影响后继实验的成功与否。现今除了手工回收方法外,许多公司都开发了方便的回收试剂盒
常规片断级的选择指南: 所谓常规级,即回收片段大小介于100bp和10kb之间,在这个范畴内包含了一般的质粒或者克隆片段的回收。主流方法是柱回收试剂盒。1. Qiaquick Gel Extraction Kit品牌:Qiagen回收范围:70bp-10kb特点:高达80%回收率操作快速简单,3步完成70bp-10kb片段的回收提供三色指示剂的电泳上样loading Buffer,方便判断和操作回收产物纯度高,可用于同位素或荧光测序、芯片分析、连接转化、酶切、标记、PCR、显微注射、体外
。 二、DNA回收试剂盒(QIAquick Gel Extraction Kit Protocol) 1. 紫外灯下仔细切下含待回收DNA的凝胶,置1.5ml离心管中,称重。 2. 加入Buffer QG(每100mg凝胶加Buffer QG 300μl),置50℃水浴10min。 3. 若回收片段小于500bp或大于4kb,则需加入异丙醇(每100mg凝胶加异丙醇100μl),混匀。 4. 将小柱放在2ml收集管上,将上述溶液加于柱上。 5. 4℃离心13000g×
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