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CpG 甲基转移酶(M.Sss
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一年
CpG Methyltransferase(M.SssI)
大量
上海钰博生物科技有限公司
100U/盒
产品及特点:
CpG甲基转移酶(M.Sssl)能识别双链DNA上的二核苷酸序列并甲基化其中的所有胞嘧啶残基(C5),其甲基化过程如下图所示:
本产品的主要用途是:
1. 阻止限制性内切酶的切割。
2. CpG甲基化依赖性基因表达的研究。
3. 研究特异序列与DNA大沟的相互作用。
4. 改变DNA的物理特性。
5. 对DNA统一进行[3H] 标记。
6. 减少限制性内切酶的酶切位点数目,提高限制性内切酶的特异性。
CpG 甲基转移酶(M.SssI)-CpG Methyltransferase(M.SssI)备注
1. CpG甲基转移酶(M.Sssl)可以特异性地模拟高等真核生物基因组的修饰模式,因而可用于研究高等级真核生物体内胞嘧啶甲基化的功能。与哺乳动物甲基转移酶不同,CpG甲基转移酶对未甲基化和半甲基化的DNA底物的甲基化效率相同,因此该酶是更为有效的DNA修饰工具。
2. 只要限制性内切酶的识别位点含有CG序列或此二核苷酸的重叠序列,CpG甲基转移酶均能有效地阻止其发挥切割活性。需要注意的是,CpG甲基转移酶使DNA甲基化,而E.coli 中的Mcr和Mrr的限制作用不受甲基化影响,故应使用Mcr-、Mrr-的E.coli 菌株作为转化的宿主菌。
3. 胞嘧啶残基被甲基化后,可影响DNA的物理特性,如:降低Z-DNA形成的自由能,增加DNA的螺旋程度,改变DNA十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联氨的反应性降低,5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。
4. MgCl2并不是必需的辅因子。Mg2+存在时,M.Sssl更倾向于分散甲基化,而不是连续甲基化,同时,M.Sssl还具有拓扑异构酶的活性。TAE电泳缓冲液(50×) 500mlTBE电泳缓冲液(5×) 250mlTAE电泳缓冲液RNA专用(50×) 100ml蛋白标准(5mg/ml BSA) 1ml PMSF(100mM) 1ml5×tris-甘氨酸电泳缓冲液 250mlSDS-PAGE电泳液(10X) 500mlSDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml 10%过硫酸铵 1.5ml30% 丙烯酰胺 (29:1) 100ml40% 丙烯酰胺 (39:1) 100ml0.5M DTT 2ml0.5M DTT 10ml10% SDS(SDS-PAGE电泳) 100mlTEMED 5ml1M Tris-HCl,pH6.8 50ml1.5M Tris-HCl,pH8.8 100mlWestern转膜缓冲液 (20x) 100mlWestern一/二抗稀释液 100mlWestern封闭液(BSA型) 100ml脱脂奶粉 100gWestern洗涤液 250mlWestern一抗二抗去除液 250mlBCIP工作液 50mg/ml 100ulNBT工作液 50mg/ml 100ul10% Sodium Azide (叠氮钠) 100ml胰酶细胞消化液 100mlL-Glutamine(100X) 100mlHanks' Balanced Salt Solution 500ml7.5% NaHCO3溶液 100ml LB (premixed LB,粉末可配500ml/瓶) 1瓶青霉素-链霉素溶液(100X) 100ml氨苄青霉素贮存液 100mg/ml 1ml氨苄青霉素贮存液 100mg/ml 10ml羧苄青霉素贮存液 100mg/ml 1ml硫酸卡那霉素贮存液 100mg/ml 1ml
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