CpG 甲基转移酶（M.SssI）-CpG Methyltr

产品及特点：

CpG甲基转移酶（M.Sssl）能识别双链DNA上的二核苷酸序列并甲基化其中的所有胞嘧啶残基（C5），其甲基化过程如下图所示：

本产品的主要用途是：

1. 阻止限制性内切酶的切割。

2. CpG甲基化依赖性基因表达的研究。

3. 研究特异序列与DNA大沟的相互作用。

4. 改变DNA的物理特性。

5. 对DNA统一进行［3H］ 标记。

6. 减少限制性内切酶的酶切位点数目，提高限制性内切酶的特异性。

CpG 甲基转移酶（M.SssI）-CpG Methyltransferase（M.SssI）备注

1. CpG甲基转移酶（M.Sssl）可以特异性地模拟高等真核生物基因组的修饰模式，因而可用于研究高等级真核生物体内胞嘧啶甲基化的功能。与哺乳动物甲基转移酶不同，CpG甲基转移酶对未甲基化和半甲基化的DNA底物的甲基化效率相同，因此该酶是更为有效的DNA修饰工具。

2. 只要限制性内切酶的识别位点含有CG序列或此二核苷酸的重叠序列，CpG甲基转移酶均能有效地阻止其发挥切割活性。需要注意的是，CpG甲基转移酶使DNA甲基化，而E.coli 中的Mcr和Mrr的限制作用不受甲基化影响，故应使用Mcr-、Mrr-的E.coli 菌株作为转化的宿主菌。

3. 胞嘧啶残基被甲基化后，可影响DNA的物理特性，如：降低Z-DNA形成的自由能，增加DNA的螺旋程度，改变DNA十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联氨的反应性降低，5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。

4. MgCl2并不是必需的辅因子。Mg2+存在时，M.Sssl更倾向于分散甲基化，而不是连续甲基化，同时，M.Sssl还具有拓扑异构酶的活性。TAE电泳缓冲液(50×)    500ml
TBE电泳缓冲液(5×)    250ml
TAE电泳缓冲液RNA专用(50×)    100ml
蛋白标准(5mg/ml BSA)    1ml    
PMSF(100mM)    1ml
5×tris-甘氨酸电泳缓冲液    250ml
SDS-PAGE电泳液（10X）    500ml
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)    2ml
非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X)    2ml    
10%过硫酸铵    1.5ml
30% 丙烯酰胺 (29:1)    100ml
40% 丙烯酰胺 (39:1)    100ml
0.5M DTT    2ml
0.5M DTT    10ml
10% SDS(SDS-PAGE电泳)    100ml
TEMED    5ml
1M Tris-HCl,pH6.8    50ml
1.5M Tris-HCl,pH8.8    100ml
Western转膜缓冲液 （20x）    100ml
Western一/二抗稀释液    100ml
Western封闭液(BSA型）    100ml
脱脂奶粉    100g
Western洗涤液    250ml
Western一抗二抗去除液    250ml
BCIP工作液 50mg/ml    100ul
NBT工作液 50mg/ml    100ul
10% Sodium Azide (叠氮钠)    100ml
胰酶细胞消化液    100ml
L-Glutamine(100X)    100ml
Hanks' Balanced Salt Solution    500ml
7.5% NaHCO3溶液    100ml    
LB (premixed LB，粉末可配500ml/瓶)    1瓶
青霉素-链霉素溶液(100X)    100ml
氨苄青霉素贮存液 100mg/ml    1ml
氨苄青霉素贮存液 100mg/ml    10ml
羧苄青霉素贮存液 100mg/ml    1ml
硫酸卡那霉素贮存液 100mg/ml    1ml