5'-RACE试剂盒-5'-RACE Kit

产品及特点
研究真核基因的最基础的工作之一就是确定其转录起始位点，目前最通用的方法是5'-RACE法，RACE（Rapid-Amplification of cDNA Ends是Frohman发明的、通过PCR快速克隆cDNA末端的技术，它在不建立cDNA文库的前提下，利用已知cDNA序列设计引物，通过往两端延伸和扩增获得最5'-端的序列。其原理图如下：

5'-RACE试剂盒-5'-RACE Kit使用及效果
先用基因专一性引物A和总mRNA模板进行逆转录，然后用TdT酶和dATP底物进行加尾，再用基因专一性引物B和5'-RACE引物A和5'-RACE引物B三条引物进行第一轮PCR，PCR产物再用基因专一性引物C和5'-RACE引物C进行第二轮PCR，所得片段即可用于后续试验（包括测序和克隆）。
蛋白标准(5mg/ml BSA)    1ml    
PMSF(100mM)    1ml
5×tris-甘氨酸电泳缓冲液    250ml
SDS-PAGE电泳液（10X）    500ml
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)    2ml
非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X)    2ml    
10%过硫酸铵    1.5ml
30% 丙烯酰胺 (29:1)    100ml
40% 丙烯酰胺 (39:1)    100ml
0.5M DTT    2ml
0.5M DTT    10ml
10% SDS(SDS-PAGE电泳)    100ml
TEMED    5ml
1M Tris-HCl,pH6.8    50ml
1.5M Tris-HCl,pH8.8    100ml
Western转膜缓冲液 （20x）    100ml
Western一/二抗稀释液    100ml
Western封闭液(BSA型）    100ml
脱脂奶粉    100g
Western洗涤液    250ml
Western一抗二抗去除液    250ml
BCIP工作液 50mg/ml    100ul
NBT工作液 50mg/ml    100ul
10% Sodium Azide (叠氮钠)    100ml
胰酶细胞消化液    100ml
L-Glutamine(100X)    100ml
Hanks' Balanced Salt Solution    500ml
7.5% NaHCO3溶液    100ml    
LB (premixed LB，粉末可配500ml/瓶)    1瓶
青霉素-链霉素溶液(100X)    100ml
氨苄青霉素贮存液 100mg/ml    1ml
氨苄青霉素贮存液 100mg/ml    10ml
羧苄青霉素贮存液 100mg/ml    1ml
硫酸卡那霉素贮存液 100mg/ml    1ml