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北京百奥莱博科技有限公司
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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京全蛋白提取试剂盒(强)价格,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:全蛋白提取试剂盒(强)
产地:国产|进口
编号:QN1069
规格:50T|100T
全蛋白提取试剂盒(强)用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,作用较为强烈,可快速获得总蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。
操作方法:
1、组织总蛋白的提取
(1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF;混匀,放置在冰上备用;
(2)称取0.1g的新鲜组织,放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处,用眼科剪将组织块尽可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直至没有明显的组织块,这个过程注意冰上操作;
(3)将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中,4℃12000g离心30min;
(4)吸取上清至新的管中;
(5)进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
2、细胞总蛋白的提取
裂解液的用量:107个细胞需要裂解液1ml;
贴壁细胞:弃去培养基,用冷的PBS洗两次,弃去PBS,然后加入计算好的细胞裂解液;在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞,
将刮离的细胞裂解液移入EP管中,颠倒裂解20-30min
悬浮细胞:4℃400g离心收集细胞,用冷的PBS洗两次细胞,同样按细胞数加入裂解液,
涡旋10s,放置冰上裂解10min,重复3-4次;
裂解完毕之后,将细胞裂解液4℃12000g离心30min;
将上清移入新的EP管中;
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
注意事项:
实验过程,所有试剂都要需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境;
PSMF(有毒)现用现加,因为PMSF在水溶液中会快速降解;
储存条件 :-20℃
关键词:百奥莱博,全蛋白提取试剂盒,强,全蛋白提取试剂盒(强),QN1069
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| 编号 | 名称 |
| QN0765 | 甲基-β-环糊精 |
| QN0085 | *啶酮酸 |
| QN1289 | DCFH-DA活性氧ROS荧光探针 |
| QN0055 | 甲氧苄啶 |
| QN0290 | DiI标记乙酰化低密度脂蛋白 |
| QN0565 | Brdu |
| QN1155 | ECL化学发光法检测试剂盒(人IgG) |
| QN0963 | 通用引物 T7 |
| QN0709 | 聚乙二醇 PEG 20000 |
| QN1221 | SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(FITC) |
| QN0406 | α-葡萄糖苷酶 |
| QN0345 | L-苹果酸 |
| QN0111 | 维生素B12(钴胺素) |
| QN0658 | 四丁基*化铵 |
| QN0275 | 重组金黄色葡萄球菌蛋白A |
| QN1080 | 非变性组织/细胞裂解液 |
| QN1120 | 膜封闭液(Western Blot) |
| QN0730 | 甜菜碱 |
| QN0068 | 盐*(代"酸")四环素 |
| QN0091 | *霉素溶液 |
| QN0192 | D-阿拉伯糖 |
| QN1318 | PI溶液(1mg/ml) |
| QN1288 | 脂质体2000 |
| QN0514 | 胶原蛋白酶Ⅳ |
| QN0550 | 酵母RNA |
| QN1292 | Adenine Sulfate 腺嘌呤硫*(代"酸")盐二水合物 |
| QN1311 | 活性氧检测试剂盒 |
| QN1024 | EB染色液 |
| QN0226 | N6-异戊烯基腺嘌呤(植物细胞培养级) |
| QN0673 | *化铯 |
| QN1164 | 10%过硫*(代"酸")铵 |
| QN0205 | 垂体促卵泡素(FSH) |
| QN0725 | β-甘油磷酸二*盐 |
| QN0485 | 脂肪酶 |
| QN0830 | 丙*(代"酸")*倍他索 |
| QN0452 | 乙酰辅酶A |
| QN0806 | 1-乙酰基-2-*基肼 |
| QN0044 | 替硝唑 |
| QN0810 | 虾青素 |
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文献和实验【求助】新手 请问western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗
xungufeng820 各位大侠: 小弟是新手,师兄们也没做过的,不知western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗?急盼回复!万分感谢! snowxyh 我用过总蛋白提取试剂盒提蛋白,之后western-blot检测NF-KB,但是感觉这样得到的蛋白浓度很稀,需要比较大的上样量才能检测出来,个人感觉,还是用传统的细胞匀浆裂解,离心提取上清,这样得到的蛋白浓度大,做试验结果好
原理将样品经增菌后划平板分离单菌落,挑取可疑菌落到胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤 (TPGY)培养基培养,对培养物用 DNA 提取试剂盒抽提 DNA,进行 PCR 扩增,用琼脂糖凝胶电泳检验 PCR 产物中是否含有肉毒杆菌的的特征条带,从而初步判断食品是否被肉毒杆菌污染。 二、仪器和试剂 紫外检测仪 NanoDrop1000 (Eppendorf),台式微量冷冻离心机 Microfuge 22R(Beckman Counter),凝胶成像分析系统 Gel DocTM XR (Bio
Blot 亦可用提取试剂溶解。 常见问题及解决方法: 1. 提取的蛋白量少:1) 组织蛋白含量较少,如水果等,可增加组织量;2) 组织匀浆不充分,如纤维较多的组织,破碎较困难,应适当延长匀浆时间;3) 组织过老或水分丢失致使其干燥,故尽量选用新鲜较嫩的组织;4) 甲醇或丙酮沉淀后蛋白溶解不充分,应延长溶解时间或使用较强的蛋白溶解剂。 2. 蛋白质量不佳:1)提取的蛋白有多酚或色素等杂质残留,可重复用丙酮或甲醇沉淀;2) 蛋白质降解,操作各步骤均应在冰上进行;加入蛋白酶抑制剂。 普利
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