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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Colony PCR Kit 2.0
- 库存:
大量
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 规格:
50次/盒
产品及特点
本产品可用于不经过E.coli 培养和质粒提取而直接从转化子中筛选重组子,其原理是直接利用E.coli 菌落作为PCR模板,以识别载体质粒或/和插入片段顺序的寡核苷酸为引物对重组子进行筛查,通过PCR产物的有无和片段的大小来判断外源DN**段是否被成功克隆到载体质粒之中,使用本产品可以使质粒鉴定过程从两天缩短到几小时。
1. 简单快速,用户只需要提供PCR引物和E.coli 菌落,不需要细菌培养和质粒提取,整个筛选过程从一天缩短到2-3小时,节约时间和成本。本产品与常用E.coli 菌株和载体兼容。既可小规模筛选,也适用于大规模筛查。
2. 高灵敏度,既可用于高拷贝质粒,也适合于低拷贝质粒。
3. 高特异性,本产品采用了十分有效的办法控制了培养基上残留质粒对PCR的影响,使假阳性率低于5%,而绝大部分同类产品的十分容易出现假阳性。
4. PCR反应体系中含有惰性电泳染料,反映完成后可直接上样电泳,不需另加上样液。
5. 处理过的菌落样品低温长期保存后仍能用于PCR筛查。
6. 性价比高,价格更质粒提取试剂相当,但节约一天时间。
菌落PCR试剂盒2.0-Colony PCR Kit 2.0使用及效果
将一个E.coli 菌落直接挑入100 μ L溶菌液中,37℃保温30分钟,100℃变性5分钟后短暂离心,取3 μ L加入预配的PCR反应液中,然后再加入Taq DNA聚合酶(试剂盒带)和引物(用户自备),补水到30 μL,PCR后直接取10 μL电泳。
小量琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 200T
大量DNA产物纯化试剂盒 50T
大量DNA产物纯化试剂盒 100T
大量DNA产物纯化试剂盒 200T
多功能DNA纯化回收试剂盒 50T
多功能DNA纯化回收试剂盒 100T
多功能DNA纯化回收试剂盒 200T
小分子量DNA片段纯化回收试剂盒 50T
小分子量DNA片段纯化回收试剂盒 100T
小分子量DNA片段纯化回收试剂盒 300T
玻璃奶DNA快速纯化回收试剂盒 50T
玻璃奶DNA快速纯化回收试剂盒 100T
玻璃奶DNA快速纯化回收试剂盒 300T
酵母质粒小量提取试剂盒 200T
高纯度酵母质粒小量提取试剂盒 50T
高纯度酵母质粒小量提取试剂盒 100T
高纯度酵母质粒小量提取试剂盒 200T
酵母质粒中量提取试剂盒 50T
酵母质粒中量提取试剂盒 100T
酵母质粒中量提取试剂盒 200T
高纯度酵母质粒中量提取试剂盒 50T
高纯度酵母质粒中量提取试剂盒 100T
高纯度酵母质粒中量提取试剂盒 200T
酵母质粒大量提取试剂盒 5T
酵母质粒大量提取试剂盒 10T
酵母质粒大量提取试剂盒 20T
高纯度酵母质粒大提试剂盒 5T
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文献和实验then 72¡C x 3min) followed by 72¡C x 20 min and a 4¡C soak. (5ul run out on a mini gel should be sufficient to see product.) 10X TAQ Buffer: 0.2M TRIS pH8.3 15mM MgCl2 0.25M KCl 0.5% TWEEN 20 上一篇:Yeast Colony PCR--酵母菌落PCR
菌落PCR(Colony PCR)可不必提取基因组DNA,不必酶切鉴定,而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增,省时少力。建议使用载体上的通用引物。通常利用此方法进行重组体的筛选或者DNA测序分析。最后的PCR产物大小是载体通用引物之间的插入片断大小。 具体方法: 1、PCR混合物的制备 Taq buffer(10×) 20 ul dNTP(2.5 mM) 5 ul Primer Forward(50 mM
Colony PCR 菌落PCR【Upstate Medical University】
Amberg Lab ,Upstate Medical University http://www.upstate.edu/biochem/amberg/protocols/colony_pcr.html This procedure will work for both yeast and E. coli: Take a small colony and suspend it in 5ul of H2O in a PCR tube. Heat for 5 min
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