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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-80℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
AD494(DE3) E.coli Strain
- 库存:
大量
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 规格:
1 mL/盒
产品及特点
AD494菌株来源于K12菌,有助于蛋白的形成正确的三维结构。AD494菌株含有thioredoxin reductase (TrxB)基因突变,有利于细菌胞内的二硫键形成,能够帮助蛋白形成正确的三维折叠,形成有功能活力的蛋白。AD494菌株中的thioredoxinreductase (TrxB)突变具有卡那霉素抗性,因此该宿主菌只能用于氨苄或者其他非卡那霉素抗性的质粒,进行基因蛋白表达。DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。能够利用IPTG直接进行蛋白的诱导表达。
AD494(DE3)菌种-AD494(DE3) E.coli Strain低温运输,-80℃保存,有效期一年。可溶型TMB显色底物试剂 100ml
可溶型TMB显色底物试剂 500ml
沉淀型TMB显色底物试剂 100ml
沉淀型TMB显色底物试剂 500ml
HRP-DAB底物显色试剂盒 60ml
超敏可逆蛋白显色试剂 100ml
碱性磷酸酶底物显色试剂盒(BCIP/NBT) 100 ml
胞浆总蛋白提取试剂盒 50T
植物细胞质膜提取试剂盒 50T
植物蛋白提取试剂盒 50T
细菌总蛋白提取试剂盒 50T
酵母总蛋白提取试剂盒 50T
胞浆和核蛋白分步提取试剂盒 50T
膜蛋白提取试剂盒 50T
动物组织蛋白裂解液 50ml
真核细胞蛋白裂解液 50ml
RIPA裂解液 50ml
RIPA裂解液 100ml
包涵体溶解液 50ml
包涵体溶解液 100ml
蛋白复性液 50ml
蛋白复性液 100ml
蛋白标准(5mg/ml BSA) 1ml
PMSF(100mM) 1ml
5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 250ml
SDS-PAGE电泳液(10X) 100ml
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml
非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml
10%过硫酸铵 1.5ml
30% 丙烯酰胺 (29:1) 100ml
40% 丙烯酰胺 (39:1) 100ml
0.5M DTT 2ml
0.5M DTT 10ml
10% SDS 50ml
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文献和实验Optimizing E. coli-Based Membrane Protein Production Using Lemo21(DE3) and GFP-Fusions
Optimizing the conditions for the overexpression of membrane proteins in E . coli and their subsequent purification is usually a laborious and time-consuming process. Combining the Lemo21(DE3) strain, which conveniently allows to identify
产生少量溶菌酶,而 pLysE 宿主菌产生更大量酶。这些菌株用于在诱导前抑制 T7 RNA 聚合酶的基础表达,这样可以稳定编码影响细胞生长和活力的目标蛋白的 pET 重组体。带有 pLacI 的宿主菌产生额外的抑制 pETBlue 和 pTriEx 载体基础表达的 lac 阻遏蛋白。 λ DE3 溶原化试剂盒用于制备其它遗传背景的新表达宿主菌。 AD494 菌株为硫氧还蛋白还原酶 ( trxB ) 突变菌株,能够在胞浆内形成二硫键,提供了生产正确折迭的活性蛋白的潜力。 TrxB 突变可用
定的原因可能是PrP对E.coli BL21(DE3)具有细胞毒性.pET-32a(+)来源于pBR-322,pBR-322源于ColE1.ColE1、pBR-322 、pET- 32a(+)都失去了分配功能区par.而天然质粒具有功能区par,可以保证质粒在每次细胞周期中准确的进行分离,并均等的分配到子代细胞中去.功能区 par对质粒PrP-pET-32a(+)的稳定性是不可缺少的[4].缺少功能区par的pET-32a(+)质粒在每次细胞周期中随机分配到子代细胞中去,无细胞毒性时约98
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