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- 英文名:
Amine-PEG-Alkyne,MW 5K
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上海熹垣生物
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N/A
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文献和实验一、原理deae-sephadex a-50(二乙氨基—乙基-葡萄糖凝胶a-50)为弱碱性阳离子交换剂。用NaOH将Cl-型转变为OH-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为pH6.85~7.5),其余均属酸性蛋白。pH7.2~7.4的环境中,酸性蛋白均被deae- sephadex a-50吸附,只有γ球蛋白不被吸附。因此,通过柱层析,γ球蛋白便可在洗脱中先流出,而其他蛋白则被吸附在柱上,从而便可分离获得纯化的IgG。1、试剂(1)盐析提取的人γ球蛋白(2)0.5N
钠 3ml 与 1M 碳酸氢钠 7ml 混合。 (4) 0.2M 赖氨酸溶液:称赖氨酸 29.2mg 溶于 0.01M PH9.5 碳酸缓冲液 1ml 中。 (5) 0.15M PH7.4 PBS 及生理盐水。 (6) PH7.8 饱和硫酸铵溶液及半饱和硫酸铵溶液。 (7) 萘氏试剂及聚乙二醇 (PEG , MW2000) 。 (8) 纯化的特异性抗体或抗 Ig 抗体。 (9) HRP(RZ
(6) PH7.8饱和硫酸铵溶液及半饱和硫酸铵溶液。 (7) 萘氏试剂及聚乙二醇(PEG,MW2000)。 (8) 纯化的特异性抗体或抗Ig抗体。 (9) HRP(RZ>3.0)。 (10) SepHadex G-25层析柱(2cm×50cm)。 (11) 搅拌器,分光光度计, 离心机 。 (12) 透析袋,大、小烧杯, 试管 ,吸管等。 3. 标记步骤
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