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结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒 微量法

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  • ¥5650
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC3295
  • 2025年07月13日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Granule-Bound Starch Synthase(GBSS)Activity Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC3295-100T/96S

    • 规格

      100管/96样

    结合态淀粉合成酶(GBSS)活性检
    试剂盒说明书

    微量法
    注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作
    货号:BC3295
    规格:100T/96S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    提取液 液体110 mL×2 2-8℃保存
    试剂一 液体16 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂二A 粉剂×2 2-8℃保存
    试剂二B 粉剂×2 -20保存
    试剂二C 粉剂×2 -20保存
    试剂三A 液体12mL×1 2-8℃保存
    试剂三B 粉剂×2 -20℃保存
    试剂 液体27μL×1 2-8℃保存
    试剂A 液体18mL×1 2-8℃保存
    试剂B 粉剂×2 2-8℃保存
    试剂C 粉剂×2 2-8℃保存
    试剂 粉剂×3 -20℃保存
    试剂 粉剂×1 -20℃保存
    溶液的配制:
    1. 试剂二:临用前1试剂二A加入8mL试剂一,缓慢加热,逐渐升温至煮沸使其溶解,冷却后加入1试剂B1试剂C混合溶解这样可以分两批配制并且测定用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融。
    2. 试剂三:临用前1试剂B加入5mL试剂A溶解备用,用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融。
    3. 试剂四:临用前先离心,取12.5 μL试剂四加入4 mL溶解好的试剂三混合备用(约53T),现用现配,也可根据样本量按比例配制。
    4. 试剂五:临用前1试剂B加入8mL试剂A1试剂C溶解备用,用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融。
    5. 试剂六:临用前1加入208 μL蒸馏水充分溶解,用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融。
    6. 试剂七:临用前加入2mL蒸馏水,用不完的试剂-20℃分装保存8周,避免反复冻融
    产品说明:
    GBSSEC 2.4.1.21)以束缚态存在于淀粉体中,催化淀粉链的加长反应,主要负责直链淀粉的合成。
    GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP;进一步通过反应体系中添加的 丙 酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,其中NADPH生成量与前一步反应生成的ADP数量呈正比,通过340nm下测定NADPH的增加量,可以计算GBSS活性。

    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    自备的仪器和用品
    紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96UV、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

    操作步骤具体操作步骤详见“产品资料”附件

    实验实例:
    1. 0.1g肝脏加入1mL提取液,冰浴中匀浆。10000g4℃离心10min,弃上清,在沉淀中加入1mL提取液充分混匀,置冰上,之后按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算ΔA=A2-A1=0.2685-0.2532=0.0153,按样本质量计算酶活得
    GBSS活性(U/g 质量)=43.2×ΔA÷W=6.6096 U/g 质量
    1. 0.1g柳树加入1mL提取液,冰浴中匀浆。10000g4℃离心10min,弃上清,在沉淀中加入1mL提取液充分混匀,置冰上,之后按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算ΔA=A2-A1=2.2252-2.2184=0.0068,按样本质量计算酶活得
    GBSS活性(U/g 质量)=43.2×ΔA÷W=2.9376 U/g 质量
    参考文献:
    1. Jiang H, Dian W, Wu P. Effect of high temperature on fine structure of amylopectin in rice endosperm by reducing the activity of the starch branching enzyme[J]. Phytochemistry, 2003, 63(1): 53-59.
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    图标文献和实验
    该产品被引用文献
    Natural variation of an autophagy-family gene among rice subspecies affects grain size and weight点击查看
    AuthorShiying Huang, Peng Wang, Caijing Li, Qingwen Zhou, Tao Huang, Yicong Cai, Qin Cheng, Hui Wang, Qi Zhong, Zhihao Chen, Liping Chen, Haohua He, Jianmin BianPublish_toCrop Journal
    IF6.6000PMID
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