WE0225型RNase A溶液(100mg/ml)北京价格

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北京百奥莱博专业生产供应WE0225型RNase A溶液(100mg/ml)北京价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：WE0225型RNase A溶液(100mg/ml)北京价格
品牌：百奥莱博
规格：1ml
编号：WE0225
英文名：RNase A(100mg/ml)

WE0225型RNase A溶液(100mg/ml)北京价格极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
PY02-369  麦康凯肉汤(USP、EP)  250克  
L-(+)-二*甲酰酒石酸一水物 Mandelonitrile Lyase 62708-56-9
ARB10238 人ω干扰素(IFN-ω)检测服务 Human interferon ω,ifn-ω ELISA KIT
13408-09-8 β-Glycerol phosphate disodiu*(代"m") salt hydrate β-甘油磷酸二*盐
ARB11097 人金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)含量测试 
ARB10823 人抗利尿激素(ADH)代做ELISA实验 Human antidiuretic hormone,adh ELISA KIT
ARB12627 大鼠维生素E(VE)elisa检测说明书 Rat vitamin e,ve ELISA KIT
J0305          兔抗牛IgG(H+L)抗血清            
9037-22-3 支链淀粉 Amylopectin
9008-02-0 牛血红蛋白 Hemoglobin
BL1291 SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
7647-14-5 Sodium Chloride  *化*
ARB11543 人疱疹病毒6型抗体(IgM)含量检测 
盐*(代"酸")吉西他滨 Acetylsalicylic acid 122111-03-9
HC0127 硝酸纤维素膜(NC)
ARB13737 兔基质金属蛋白酶1(MMP-1)含量分析 Rabbit matrix metalloproteinase 1,mmp-1 ELISA KIT
乙二*(代"胺")四乙酸二*盐 D(+)-Arabitol 25102-12-9
BTN3150 RNA电泳液,10× RNARUN Buffer, 10×
硅烷偶联剂KH560 D-(+)-Raffinose pentahydrate 2530-83-8
1132-61-2 MOPS   3-(N-玛啡啉)丙磺酸
PY02-016  霉菌培养基  250克  
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·Babuddy超保真DNA聚合酶
编号：WE0109
英文名称：Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase
规格：100U
  Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase是一种快速、高扩增效率的高保真DNA聚合酶，具有5"-3"DNA聚合酶活性和3"-5"外切核酸酶活性。经过改造的Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase，其活性区域融合有一段聚合增强结构域，独特的结构极大提升了保真性和延伸速度。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase的保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍，是普通Pfu的6倍。其延伸速率为15-30 sec/kb，成功克服了普通Pfu酶扩增效率低、扩增速度慢的缺陷，大大缩短了反应时间。本品特别适合于在基因克隆实验中扩增长片段DNA，尤其在扩增>10 kb的DNA片段时，优势更加明显，所扩增的片段最长可达20kb。

  本产品中包含两种PCR缓冲液，经过优化的缓冲体系使酶的应用更加广泛，即使以复杂的基因组DNA为模板，也可以保证很高的特异性和长片段的扩增。特有的PCR增强剂DMSO使GC含量高，有二级结构和重复序列的复杂模板也能得到高效扩增。

  使用本产品扩增得到的PCR产物的3"端不带有“A”碱基，可直接克隆于平末端载体中。如需进行T/A克隆，需在PCR产物末端添加“A”后进行克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高、保真性强的特点。适用于基因克隆、基因定点突变、SNP等实验。

产品特点
1、高保真性：保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍，普通Pfu的6倍。
2、扩增速度快：其延伸速率为15-30sec/kb，成功克服了普通Pfu酶扩增效率低、扩增速度慢的缺陷。
3、特别适合于扩增长片段：扩增的片段长度可长达20kb。

产品组成：

 

组份	20μl×250次(100 U)
Babuddy DNA Polymerase，2U/μl	50μl
5×Babuddy HF Buffer	1.5ml
5×Babuddy GC Buffer	1.5ml
100% DMSO	0.5ml
50 mM MgCl2	1.5ml

注意：本产品的5×Babuddy HF 和GC Buffer中含有7.5 mM*离子。

活性定义：
在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制：
1、核酸内切酶活性检测：50μl反应体系中，10 U本酶与0.2 mM dNTPs和1μg的pUC19质粒于37℃温育4小时，<10%的pUC19质粒由超螺旋变为缺刻状态。
2、7.5 kb基因组DNA PCR扩增：50μl反应体系，1×Babuddy HF Buffer，50ng基因组DNA，1 U Babuddy DNA聚合酶，200μM dNTPs和1μM引物，30个循环PCR扩增出7.5 kb目的片段。
3、20 kb λDNA PCR扩增：50μl反应体系，5×Babuddy HF Buffer，10ng λDNA，1 UBabuddy DNA聚合酶，200μM dNTPs和1μM引物，22个循环PCR扩增出20 kb目的片段。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	20μl反应体系	50μl反应体系	终浓度
5×Babuddy HF Buffer	4μl	10μl	1×
dNTP Mix，2.5 mM each	1.6μl	4μl	200μM each
Forward Primer，10μM	1μl	2.5μl	0.5μM
Reverse Primer，10μM	1μl	2.5μl	0.5μM
Template DNA	适量	适量	<250ng
100% DMSO	0.6μl	1.5μl	3%
Babuddy DNA Polymerase	0.2 μ	l 0.5μl	1 U/50μl
ddH2O	up to 20μl	up to 50μl

注意：
1)对于复杂模板或高GC含量的模板，请使用5×Babuddy GC Buffer。
2)可选步骤：对于复杂模板，如高GC含量、带有复杂二级结构的序列，可加入本产品中提供的100%DMSO或其他PCR添加物，以提高扩增效率，推荐终浓度为3%，也可按照2%的浓度递增优化。由于DMSO可以降低引物的Tm值，因此若DMSO使用浓度很高，需降低退火温度。

a.模板：在50μl PCR反应体系中，DNA模板的建议用量为低复杂度模板(如质粒DNA，λDNA等)1 pg- 10ng，高复杂模板(如基因组DNA)50-250ng。
b.引物：引物浓度请以终浓度0.2-1.0μM作为设定范围的参考，推荐终浓度为0.5μM。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
c.*离子：*离子浓度请以终浓度1.5-3 mM作为设定范围的参考。本产品的 5×Babuddy HF Buffer和GC Buffer中已经含有7.5 mM*离子，可根据dNTP浓度、引物和模板来调整，由此优化反应体系。若引物或模板中有螯合剂(如EDTA)存在，则应提高*离子浓度。若需要对*离子浓度进行优化时，可使用本产品中提供的MgCl2按照0.5 mM浓度梯度逐步调整。
d.dNTPs：反应体系中dNTPs的浓度一般为每种200μM，使用本品时，不推荐使用dUTP和带有尿嘧啶的引物或模板。
e.Babuddy酶的浓度：Babuddy酶推荐的使用浓度为1 U/50μl 反应体系，可在0.5-2 U/50μl 反应体系之间优化酶的浓度。

2、PCR反应条件
常规三步法PCR反应：

步骤	温度	时间	循环数
预变性	98℃	30 s-3 min
变性	98℃	5-10 s	25-35 个循环
退火	45-72℃	10-30 s
延伸	72℃	2-4 kb/min
终延伸	72℃	5-10 min

a．变性：简单模板的预变性温度为98℃，预变性时间为30 s。对于比较复杂的模板，预变性时间可延长至3分钟。
b．退火：使用本产品时，退火温度设定的基本原则是，当引物长度小于或等于20 nt时，退火温度为引物最低的Tm；当引物长度大于20 nt时，退火温度应在最低Tm的基础上以Tm+3℃退火10-30 s。当无法得到理想的扩增效率时，应以最低的Tm值逐步提升至模板延伸温度。对于Tm高的引物可以使用两步法PCR。
c．延伸：延伸时间应根据所扩增片段的长度和模板复杂程度设定，本产品中所包含的Babuddy DNA Polymerase扩增效率为2-4 kb/min，复杂性低的模板可用4 kb/min，复杂性高的基因组DNA模板，延伸时间则应为2 kb/min，对于一些cDNA模板，延伸时间可增加到1.5 kb/min。
d．循环次数：可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数。

当引物的退火温度较高时，建议使用两步法进行PCR扩增：

步骤	温度	时间	循环数
预变性	98℃	30 s-3 min
变性	98℃	5-10 s	25-35 个循环
延伸	72℃	2-4 kb/min
终延伸	72℃	5-10 min

储存条件：-20℃，避免反复冻融。


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·二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24)
编号：WE0240
英文名称：NGS Multiplex Oligos For Illumina(Index Primers Set II)
规格：24次|96次
  本试剂盒提供了二代测序建库中使用的adaptor与primer，专为illumina平台建库设计，index primer的设计可满足多重高通量测序时制备多个文库样本的需要，制备的文库可用于Illumina GAIIx，HiSacnSQ、HiSeq 2500/2000/1000和MiSeq sequencing等测序平台的测序。

试剂盒组成：

组份	24次	96次
Adaptor for Illumina	60μl	240μl
Universal Primer for Illumina	30μl	120μl
Index 13 -27 Primers for Illumina	12×10 μ l	12×20 μ l

自备仪器、试剂和耗材
1、磁力架：建议使用DynaMagTM-2(货号： 12321D)。
2、DNA纯化回收试剂盒：建议使用百奥莱博磁珠法DNA纯化回收试剂盒(货号： WE0205)。
3、DNA建库试剂盒：建议使用百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(货号： WE0229)。
4、无水乙醇。
5、反应管：建议使用低吸附的PCR管与1.5ml离心管；枪头：建议使用高质量过滤枪头防止试剂盒、文库样本污染。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、Adaptor为双链结构，请勿将其置于室温温度以上，以免发生解链、影响使用。
2、Index primer开盖前请短暂离心，使液体收集到管底，以免不同引物间交叉污染。

使用流程


操作步骤：

百奥莱博二代测序多样本接头引物试剂盒使用方法请按照百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(Cat .No.WE0229)protocol进行。

Adaptor for Illumina：
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
Universal Primer for Illumina：
5-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T -3´
Index 13–27 Primers for Illumina：

	Index Primers for Illumina	Index
Index 13 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTGTTGACTGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	AGTCAA
Index 14 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATACGGAACTGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	AGTTCC
Index 15 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCTGACATGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	ATGTCA
Index 16 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGGGACGGGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	CCGTCC
Index 18 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGTGCGGACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GTCCGC
Index 19 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGTTTCACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GTGAAA
Index 20 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAGGCCACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GTGGCC
Index 21 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCCGAAACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GTTTCG
Index 22 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTACGTACGGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	CGTACG
Index 23 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATCCACTCGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	GAGTGG
Index 25 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATATCAGTGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	ACTGAT
Index 27 Primerfor Illumina	5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAAGGAATGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´	ATTCCT

储存条件：-20℃

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