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北京百奥莱博科技有限公司
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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")50×TAE 核酸电泳和回收,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:50×TAE 核酸电泳和回收
规格:500ml
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:WE0216
本品为50×Tris-乙酸缓冲液,是常用的核酸电泳缓冲液。
欲咨询购买50×TAE 核酸电泳和回收,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
ARB10237 人γ*基丁酸(GABA)含量检测 Human gamma-aminobutyric acid,gaba ELISA KIT
莫西沙星 Boc-Asn(Trt)-OH 151096-09-2
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50×TAE 核酸电泳和回收关键词:WE0216,百奥莱博,50×TAE
·高效多重PCR Mix
编号:WE0124
英文名称:Super Multiplex PCR Mix
规格:1ml|5ml
本品是由SuperStar DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系,专用于多重PCR扩增。本品所含的 SuperStar DNA Polymerase是全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,可有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异性扩增。独特的缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,扩增范围更广泛。本产品适用于各种类型的多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×Super Multiplex PCR Mix | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 |
| 2×Super Multiplex PCR Mix | 25μl |
| Primer Pool | 0.1-0.3μM |
| DNA or cfDNA | 5ng-100ng |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-0.3μM作为设定范围的参考。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 2 min | |
| 变性 | 98℃ | 20 s | 30-40个循环 |
| 退火延伸 | 65℃ | 90 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
50×TAE 核酸电泳和回收关键词:WE0216,百奥莱博,50×TAE
·抗HA标签单克隆抗体
编号:WE0349
英文名称:Anti HA-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的HA标签,而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的HA-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成流感病毒血凝素多肽(YPYDVPDYA)
应用范围:
WB(1:500-5000)
ELISA(1:200-20000)
IP(2 µg-5 µg)
·0.5 M Tris-HCl缓冲液(pH6.8)
编号:WE0285
英文名称:0.5 M Tris-HCl(pH6.8)
规格:500ml
该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的HA标签,而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的HA-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成流感病毒血凝素多肽(YPYDVPDYA)
应用范围:
WB(1:500-5000)
ELISA(1:200-20000)
IP(2 µg-5 µg)
·6×DNA上样缓冲液
编号:WE0221
英文名称:6×DNA Loading Buffer
规格:10ml
该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的HA标签,而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的HA-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成流感病毒血凝素多肽(YPYDVPDYA)
应用范围:
WB(1:500-5000)
ELISA(1:200-20000)
IP(2 µg-5 µg)
·miRNA cDNA第一链合成试剂盒
编号:WE0157
英文名称:miRNA cDNA Synthesis Kit
规格:25次
本试剂盒采用在miRNA 3’末端加多聚A尾的方法来使miRNA具有Poly(A)尾,之后再使用Oligo(dT)-Universal tag通用逆转录引物进行逆转录反应,最终合成miRNA对应的第一链cDNA。
miRNA cDNA第一链合成试剂盒包含miRNA 3’末端Poly(A)尾修饰过程及修饰后逆转录过程需要的全部试剂。该试剂盒具有非常高的Poly(A)修饰和逆转录效率,可以从1ng-2μg的total RNA中有效获得miRNA对应的cDNA第一链。并且操作简便、快捷,可以用于从一个反应合成的cDNA中同时检测多种miRNA,不仅减少了误差、节约了样品,同时还实现了检测的高通量。
试剂盒组成:
| 组份 | 25次 |
| Tris-Hcl,1 mM,PH 8.0 | 1ml |
| E.coli Poly(A)Polymerase,5U/μl | 15μl |
| 10×Poly(A)Polymerase Buffer | 80μl |
| ATP,10 mM | 15μl |
| RT Primer,25μM | 90μl |
| 5×UltraRT Buffer | 120μl |
| UltraPure dNTP Mix,10 mM each | 30μl |
| UltraRT | 15μl |
| RNase-Free Water | 1ml |
备注:本试剂盒须与miRNA荧光定量检测试剂盒(WE0158)配套使用。
自备实验材料:1ng-2μg的总 RNA,或0.1ng-1μg的小分子RNA。
注意事项:
预防RNase污染,应注意以下几方面:
1、使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2、玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
3、配制溶液应使用无RNase的水。
4、操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
使用方法:
A.miRNA加Poly(A)尾的过程:
1、首先根据所用RNA的量,按如下公式,用1 mM Tris(PH8.0)来稀释10 mM ATP:
ATP稀释系数=5000/__ng的总RNA
例:如果总RNA的起始用量为100ng,那么ATP稀释系数=5000/100=50。即将ATP稀释50倍(1μl的10 mM ATP加49μl的1 mM Tris,PH8.0)。
2、向冰浴中预冷的无RNase反应管中加入以下试剂至总体积25μl。
| 试剂 | 25μl反应体系 | 终浓度 |
| total RNA | Xμl | 可达2μg |
| 10×Poly(A)Polymerase Buffer | 2.5μl | 1× |
| 第“1”步中稀释好的ATP | 1μl | — |
| E.coli Poly(A)Polymerase, 5U/μl | 0.5μl | 2.5 U |
| RNase-Free Water | up to 25μl | — |
注意:反应中使用的total RNA必须含有小分子RNA。
此过程也可以直接使用小分子RNA(建议加入量为2-5μl。请根据目的miRNA的丰度来确定加入量)。
3、轻轻混匀上述反应液,短暂离心将液体收集于管底。37℃,孵育15分钟。此过程结束后,立刻进行第一链cDNA的合成,或于-20℃暂存。如需长期保存,建议存放于-80℃。
B.修饰后的miRNA cDNA第一链合成的过程:
1、向冰浴中预冷的无RNase反应管中加入下表中试剂,至终体积20μl:
| 试剂 | 20μl反应体系 |
| 上述Poly(A)反应液 | 4μl |
| UltraPure dNTP Mix,10 mM each | 1μl |
| RT Primer,25 μ M | 3μl |
| 5×UltraRT Buffer | 4μl |
| UltraRT | 0.5μl |
| RNase-Free Water | 7.5μl |
2、轻轻混匀上述反应液,短暂离心将液体收集于管底。42℃,孵育50分钟。
3、85℃,孵育5分钟,终止反应。合成的cDNA反应液可以直接进行荧光定量检测实验,也可以于-20℃保存备用。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京百莱博科技有限公司专业生产核酸电泳和回收产品,欢迎来电咨询选购50×TAE 核酸电泳和回收。
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