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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Endonuclease V
- 库存:
大量
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
250U盒
核酸内切酶 V产品及特点:
核酸内切酶V 是在 E. coli 中发现的一种 DNA 修复酶。它识别 DNA 中的脱氧次黄嘌呤核苷,即脱氧腺苷的去氨基产物。核酸内切酶 V,也称为脱氧次黄嘌呤核苷 3内切酶,识别含脱氧次黄嘌呤核苷 (无论配对与否) 的双链或单链DNA 。也可识别含脱碱基 (AP) 位点或尿素、碱基错配、插入/缺失错配、发夹结构、未配对 loop 环、折叠 flaps 和类 -Y 型结构的 DNA ,但是识别后者的能力不如前者。普遍认为核酸内切酶 V 发挥 DNA 修复功能时,还需另外一种蛋白的存在,因为它不能切除 DNA上的脱氧次黄苷或受损碱基。 核酸内切酶 V 对错配脱氧次黄嘌呤核苷 3 端第二个或第三个磷酸二酯键进行切割,切割第二个磷酸二酯键的效率是 95%,第三个磷酸二酯键的效率是 5%,产生一个 3 羟基、5 磷酸的切刻。 其反应示意图如下:
核酸内切酶 V本产品具体有下列特点:
1. 切割错配
2. 切割含脱氧次黄嘌呤核苷的寡核苷酸,对含错配碱基的寡核苷酸亲和力较弱
反应条件
1X Buffer 4 [50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2 , 1 mM DTT(pH 7.9)]。37℃ 温育。
Buffer 成分
10 mM Tris-HCl,300 mM NaCl,1 mM DTT,1 mM EDTA,50%Glycerol,0.15% Triton® X-100,pH 8.0 @ 25℃
热失活
65 ℃ 20 分钟。
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文献和实验在核酸水解酶中,为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶,与核酸外切酶相对应。从对底物的特异性来看,可分为 DNaseⅠ、 DNaseⅡ等仅分解 DNA的酶;脾脏 RNase、 RNaseT1 等仅分解 RNA的酶。如链孢霉( Neurospora)的核酸酶就是既分解 DNA又分解 RNA的酶。一般来说,大都不具碱基特异性,但也有诸如脾脏 RNase、 RNaseT1 等或限制性内切酶那种能够识别并切断特定的碱基或碱基序列的酶。
M = A or C; K = G or T; S = C or G; H = A, C or T; V = A, C or G; B = C, G or T; D = A, G or T; N = G, A, T or C.
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