GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)

GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)产品及特点：

该GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) 能将双链二核苷酸识别序列中所有胞嘧啶残基(C5) 甲基化。

它具体有下列特点：

1. 阻止限制性内切酶的切割

2. 改变 DNA 的物理特性

3. 对 DNA 统一进行 [3H] 标记

活性单位定义

1 酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μgλDNA 不被 HaeIII 限制性核酸内切酶切割所需要的酶量。

GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)反应条件

1X 反应缓冲液 + SAM [50 mM NaCl，50 mM Tris-HCl，10 mM DTT (pH8.5 @ 25℃) ]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸 (SAM，随酶提供) 。37℃ 温育。

Buffer 成分

15 mM Tris-HCl，0.2 mM NaCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，200 μg/ml BSA，50% Glycerol，pH 7.4 @ 25℃

热失活

65℃ 20 分钟。

备注

胞嘧啶残基被甲基化后，可影响 DNA 的物理特性，如：降低 Z-DNA 形成的自由能，增加 DNA 的螺旋程度，改变 DNA 十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联氨的反应性降低，5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。