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- HZbscience
- 中国/上海
- HZ120411-50
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
T4 DNA Polymerase
- 库存：
大量
- 供应商：
上海沪震实业有限公司
- 规格：
50U盒
T4 DNA 聚合酶产品及特点：
在模板及引物存在的条件下，催化与模板互补的脱氧核苷酸依次选择性地连接在引物的3′-OH末端上的反应。本酶还具有单链DNA特异性的3′→5′核酸外切酶活性，该活性比Klenow Fragment强100～1,000倍，也作用于双链DNA，在dNTP存在条件下表现出聚合酶活性，当dNTP用尽时转为3′→5′核酸外切酶的活性。本酶不含 5′→3′的核酸外切酶活性。 此产品特点是：
1. 利用较强的 3′→5′的核酸外切酶活性，通过置换合成（Replacementsynthesis）从 DN**段的 3’末端进行标记。
2. DNA末端的平滑化。
3. 通过引物伸长法解析mRNA转录的起始点。
活性单位定义
以热变性小牛胸腺 DNA 为模板/引物，在３7℃、pH8.8 的条件下，30分钟内使10 nmol全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位（Ｕ）。
纯度2 U的本酶和1 μg的Closed circular（RFI）pBR322 DNA在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
T4 DNA 聚合酶备注
1. 本酶的最适 pH为 8～9，在 pH7.5及 pH9.7时活性约为50%。
2. 活性的表达需要Mg2+的存在。为了获得最大活性，还需要SH基的还原剂存在。
3. 整个反应体系中的离子强度超过100 mM时活性将被抑制。
4. 本酶易受模板 DNA 高级结构的影响，T4 gene 32 产物可以显著提高聚合酶活性，而 3′→5′的核酸外切酶活性则完全被抑制。
5. 在 10×反应缓冲液中直接加入 0.1% BSA 时会产生大量白色沉淀，因此在调制反应液时请按下列顺序添加试剂：dH2O→10×反应缓冲液→0.1% BSA→底物DNA。
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文献和实验PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应，对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么，对于 PCR 反应的核心成份，DNA 聚合酶，你选对了吗？ 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等，常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分，高保真聚合酶
Ligation of DNA with T4 DNA Ligase
recombination and DNA synthesis. DNA ligase from E. coli is a polypeptide with a molecular weight of 74,000 and is NAD-dependent. T4 DNA ligase is the product of gene 30 of the T4 phage, has a molecular weight of 68,000, and is ATP-dependent. Both enzymes
相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
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