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北京百奥莱博专业生产供应T4 DNA连接酶价格,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:T4 DNA连接酶价格
产地:国产|进口
规格:40000U|200000U
品牌:百奥莱博
英文名:T4 DNA Ligase
本酶可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA 连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
用途:T4 DNA Ligase常用于DNA*(代"片")段和载体、linker或adaptor等的连接。也可以用于缺刻修复及Ligase介导的RNA检测。
来源:本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of
lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5"-DNA termini concentration of 0.12 μM (300 μg/ml)。200U等于1个Weiss unit,以Weiss unit计,本产品共200单位。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规连接反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50% (v/v) glycerol。
10×Ligation Buffer:400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
失活或抑制:65℃孵育10分钟可以导致T4 DNA Ligase失活;NaCl或KCl浓度大于200mM时强烈抑制T4 DNA Ligase。
T4 DNA Ligase连接产物转化感受态后涂板LB平板的效果如上图,本品的连接产物转化感受态细菌后涂板获得的LB平板效果图。A. 双酶切后的载体自连过夜;B. 双酶切后的载体与待插入片段过夜连接。
注意事项:
1. 对于普通的转化大肠杆菌的操作,不必对连接产物进行纯化,连接产物可以直接用于转化。但用电转方法转化大肠杆菌时,通常宜先用DNA纯化试剂盒或酚氯*(代"仿")抽提方法等纯化DNA,然后再进行电转。
2. 需进行平端连接或快速连接时,推荐使用百奥莱博的快速DNA连接试剂盒(YT028/D7003)。T4 DNA Ligase可以进行平端连接,但效率较低。
3. 普通连接反应不必进行凝胶电泳观察。如果需要对于连接产物进行凝胶电泳观察,推荐先在65℃孵育10分钟使T4 DNA Ligase失活,以避免T4 DNA Ligase和DNA结合导致的条带位置迁移(band shift)。
储存条件:-20℃。
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·ARE凝胶迁移突变探针(10μM)
编号:YT207
英文名称:ARE Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的ARE consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-ARE的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用 于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
EMSA突变探针-ARE的序列如下:
5"-ACT GAG GGT GAC TCA ATA AAA TC-3"
3"-TGA CTC CCA CTG AGT TAT TTT AG-5"
EMSA突变探针-ARE中ARE的公认的位点发生了突变,从而使相应的转录因子无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常 的标记探针和ARE的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和相应转录因子的结合的条带不会被抑制。参考 下图。
一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
T4 DNA连接酶价格关键词:YT029,T4 DNA连接酶,T4 DNA Ligase
·苏木素染色液
编号:YT911
英文名称:Hematoxylin Staining Solution
规格:100ml
本染色液综合了多种经典的苏木素染色方法,例如Harris法、Mayer法等,简化了操作步骤,缩短了操作时间,并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。可以用于组织切片或培养细胞的染色。本苏木素染色液染色后细胞核呈蓝色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。本染色液可以重复使用,直至认为效果不佳时再换用新的染色液。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。
注意事项:
1. 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备90%乙醇,无水乙醇以及二甲苯。
2. 染色液可以重复使用多次,认为效果不佳时再更换新的染色液。
3. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
储存条件:室温,有效期一年。
·CTP合成酶
编号:YT608
英文名称:CTP Synthase (Crude Enzyme)
规格:100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的CTP合成酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,用于催化尿苷三磷酸生成胞苷三磷酸。
CAS:9023-56-7
外观:半透明黄色溶液
酶促反应:
ATP + UTP + L-glutamine = ADP + phosphate + CTP + L-glutamate (overall reaction)
(1a) L-glutamine + H2O = L-glutamate + NH3
(1b) ATP + UTP + NH3 = ADP + phosphate + CTP
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
T4 DNA连接酶价格关键词:YT029,T4 DNA连接酶,T4 DNA Ligase
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