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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Methylation-Specific PCR V2.0 Ki
- 库存:
大量
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
150 次盒
天净沙甲基化PCR 2.0试剂盒产品及特点:
本产品是甲基化专一性PCR试剂盒(CAT#:100923)的升级版,其亚硫酸氢盐DNA修饰试剂盒(CAT#:100922)的升级版,亚硫酸氢盐修饰DNA时要求DNA必须在单链状态,反应还必须在低温进行,常规的修饰试剂盒由于是在液相进行,要在低温下让DNA不相互复性而保持单链状态非常棘手,所以常规修饰试剂盒的修饰效率一般都不高。此外,常规方法要切换反应液,有多次沉淀步骤,使得DNA的回收率一般都不超过50%。为克服这些缺点,本公司开发出了此升级产品,它具有下列特点:
1. 用包埋的样品进行所有操作,免去所有沉淀和纯化步骤,极大简化了操作。
2. 免去了DNA提取过程,所需实验材料比常规方法更少,最少几个细胞都可以,极大地节约了宝贵材料,尤其适用于珍稀材料。
3. 包埋处理后,DNA在整个操作过程中都处于最适于修饰的单链状态,极大提高了修饰效率。
4. DNA包埋于包埋块中,切换反应液非常方便,而且DNA不会丢失,所以最终回收率都在90%以上。
5. 适用于实体材料、悬浮细胞和纯化好的DNA样品。
6. 本试剂盒提供的甲基化修饰试剂盒足够制备150多个10uL包埋块(如果用纯化好的DNA)或25个10uL包埋块(如果用悬浮细胞);本试剂盒提供的PCR试剂盒足够180次100uL体系的PCR反应。
天净沙甲基化PCR 2.0试剂盒使用及效果
详细使用步骤请参见使用手册。
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文献和实验Novoprotein CUT&Tag 2.0原理与应用培训
为了克服ChIP-Seq的缺陷,近岸蛋白质开发了ChiTag酶和CUT&Tag技术。CUT&Tag是一种革命性的新技术,它不需要甲醛交联和免疫共沉淀,即可特异性的将目的蛋白附近的DNA片段直接连上接头并打断,进行高通量测序。该方法可一管式高通量应用,或在单细胞研究中使用。该方法使用了ChiTag酶,可以在打断基因组的同时加上接头,不需要繁琐的补平加A加接头,并且可在一天内完成从细胞到测序文库制备全流程。
为了克服ChIP-Seq的缺陷,近岸蛋白质开发了ChiTag酶和CUT&Tag技术。CUT&Tag是一种革命性的新技术,它不需要甲醛交联和免疫共沉淀,即可特异性的将目的蛋白附近的DNA片段直接连上接头并打断,进行高通量测序。该方法可一管式高通量应用,或在单细胞研究中使用。该方法使用了ChiTag酶,可以在打断基因组的同时加上接头,不需要繁琐的补平加A加接头,并且可在一天内完成从细胞到测序文库制备全流程。
作为一个刚入门的科研新手时, 做 PCR 都是师兄师姐把所需引物、试剂拿来,再甩出一个 Protocol,照着程序性加样、上机就行了,感觉也没什么技术含量。轮到做自己的课题时,还真是犯了点愁,四处请教,逛论坛看各种帖子,寻找一些设计原则,最后也算形成了自己的一套流程,可以给一些还在迷茫的初学者们一些参考。下面以 (SOD1) 为例,一步步演示。基因序列查找一般的 PCR 所需序列可以在 NCBI Gene 上,但是甲基化发挥作用主要在启动子区域,基因序列要包含第一外显子的上游碱基,所以查找
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