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双荧光素酶活性检测试剂盒
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一年
Dual Luciferase Assay Kit
大量
上海沪震实业有限公司
100次盒
双荧光素酶活性检测试剂盒产品及特点:
由于检测光量子的方法非常敏感,采用生物发光(bioluminescent)法 ,是报告基因检测最常用的有效手段。荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素(luciferin)的转化,发射出光子。萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)和海肾荧光素酶(Ranilla luciferase)催化的发光反应,具有相似的光学特征和很好的浓度线性范围(7~8个数量级的线性范围),酶的检测灵敏度达10-18~10-20 mol,但两者催化的化学反应底物和最适反应条件完全不同。利用这一特性,将这两种荧光素酶配合,即可形成十分有效的双荧光素酶报告基因系统,其中Ranilla luciferase通常作为内参照。其原理如下:
双荧光素酶活性检测试剂盒本试剂盒提供了一体化形式的双荧光素酶检测系统。采用通用裂解缓冲液,适合于两种荧光素酶活性的保持,且与其他类型的报告基因检测和蛋白含量检测兼容。优化的两种酶反应体系,使每种发光反应持续数十分钟,以便于手工操作多个样品,并保证Firefly luciferase发光及时淬灭,不影响后续Ranilla luciferase的测定。优的反应体系还使两种荧光素酶活性比值趋于合理的敏感范围,更有利于后续数据的比较。该产品特点如下:
1. 准确性高:使用海肾荧光素酶作为内参照,减少了细胞数目、细胞健康状态、转染效率和非特异性细胞反应等因素的影响,使主报告基因的结果归一化
2. 高度灵敏:对两种荧光素酶的检测灵敏度达10-18~10-20 mol
3. 线性范围宽:线性范围达到7~8个数量级
4. 快速简便:一体化两步法检测,特别适合于高通量筛选
双荧光素酶活性检测试剂盒使用及效果
收取转染细胞,1x通用裂解液裂解。按一定比例混合,配制两种发光检测液。同一个样品中先后加入两种发光检测液,测定两种酶催化的发光单位RLU。(不同容器细胞所需1xULB的体积和配制发光检测液比例详见产品使用手册)
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