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Caspase 6检测试剂盒
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一年
Caspase 6 Detection Kit
大量
上海沪震实业有限公司
50次盒
Caspase 6检测试剂盒产品及特点:
Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用。Caspase 6(Mch-2)最初从人的Jurkat细胞中被发现,活化的caspase 6可以诱导细胞凋亡。Caspase 6可以剪切PARP、keratin-18及细胞核核膜上的关键组成蛋白Lamin A。Caspase家族中仅caspase 6可以剪切Lamin A。Caspase 6对于Lamin A的识别位点是VEID。本产品是基于底物Ac-VEID-pNA(acetyl-Val-Glu-Ilel-Asp p-nitroanilide)的Caspase 6分光光度法检测试剂盒,可用于检测细胞或组织裂解液中Caspase 6活性或纯化的Caspase 6活性。
Caspase 6检测试剂盒原理如下:
本产品具有下列特点:
1. 即开即用,不需要花时间准备各种成分,操作简便、快捷、安全,灵敏度高。
2. 适用于培养细胞、新鲜组织等样品的Caspase 6检测。
3. 某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖Caspase 6的机制,此时建议检测其他凋亡信号通路。
4. 与各类型分光光度计和酶标仪兼容,用酶标仪检测或容量不超过100 μL的分光光度检测杯检测时,足够可以检测50个样品。
Caspase 6检测试剂盒使用及效果
裂解样品:
1. 细胞样品 收集3-5×106个细胞,向细胞中加入150-200 μL预冷的溶液A(裂解液,每50 μL溶液A提前加入0.5 μL溶液D),冰上静置20-60 min,期间振荡3-4次。4℃,10000 rpm离心1分钟。转移上清至新离心管,取少量上清测定蛋白浓度(Bradford法)。
2. 组织样品 取50-100 mg组织样品,剪碎至3mm×3mm大小,加入150-200μL预冷的溶液A(每50 μL溶液A提前加入0.5 μL溶液D),匀浆器匀浆。匀浆液转移至预冷的离心管中,4℃,1000rpm离心5分钟。转移上清至新离心管,取少量上清测定蛋白浓度(Bradford法)。
Caspase 6检测
取50 μL 含100-200 μg蛋白的细胞或组织裂解液上清,体积不足50 μL的,用10mM PBS(pH7.2~pH7.6)补足体积至50 μL。加50 μL溶液B(每50 μL溶液B提前加入0.5 μL溶液D)。加入5 μL溶液C,37℃避光孵育4小时。酶标仪或分光光度计405nm测定吸光值。通过计算OD诱导剂/OD阴性对照的数值来确定凋亡诱导剂组Caspase 6的活化程度。
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