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- 上海
- yjto0705
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃,避光,6个月
- 库存：
大量供应
- 供应商：
上海研谨生物
- 规格：
10ml
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文献和实验一、免疫荧光技术中标本制作的基本程序近似于酶免疫组化，不同点如下： 1、免疫荧光不需要使用双氧水处理，封闭和一抗孵育与其相同。 2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育，孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4、免疫荧光在封片时常使用专用封片剂或甘油：0.01M PBS （1：1）。条件许可，建议购买抗淬灭的封片液，使标本可以保存更久。 5、荧光抗体的孵育以及后续处理需要避光。 6、荧光抗体染色假阳性可能会多，需要分别设定阳性和阴性
1.细胞爬片；2.4%多聚甲醛固定10min(固定细胞器用预冷的70%甲醇+30%丙酮)；3.PBS漂洗5min；4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化处理)；5.PBS漂洗2次，每次5min；6.1%BSA封闭30min；7.加入1%BSA稀释的一抗，于37℃杂交2h；8.PBS漂洗2次，每次5min；9.加入1%BSA稀释的二抗，于37℃杂交1h；10.PBS漂洗2次，每次5min；11.5ug/ml DAPI染色2min；12.抗淬灭封片剂封片。抗淬灭封片剂
，每次5min; 9.加入1%BSA稀释的二抗，于37℃杂交1h; 10.PBS漂洗2次，每次5min; 11.5ug/ml DAPI染色2min; 12.抗淬灭封片剂封片。 抗淬灭封片剂: 2.5% DABCO (w/v) 50mM Tris(pH8.0) 90%甘油
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