一站式平末端克隆试剂盒

一站式平末端克隆试剂盒产品及特点

基因片段用 Pfu 等DNA 聚合酶扩增得到的产物为平末端，直接克隆比较困难。做T/A 克隆时，需要在其末端添加单个碱基 A。本试剂盒提供了在平端添加单个 A 所需的所有试剂，大大方便后续的 T/A 克隆及序列分析。其原理如下：

它具有下列特点：

1. 适用范围包括：由高保真 DNA 聚合酶如 Pfu、Pwo 、DeepVent 等扩增而来的

PCR 产物；一些限制性内切酶如 EcoRV 、SmaI 等酶切产生的 DNA 片段； 粘端 DNA 用DNA 聚合酶补平后的片段。

2. 可以在任何平末端DNA 片段两端分别补上单个脱氧腺嘌呤 A，间接将 PCR 产物克隆到 T 载体上。

3． 操作快速，5 分钟就可以完成 。

一站式平末端克隆试剂盒使用及效果

将100 ng DNA ，加入 5μl 10 × Cloning Buffer， 加入无菌水使反应的总体积为 50 μl，混匀。 72℃保温，5 分钟。产物回收或者-20℃保存备用。