EZ-T™ Cloning Vector

EZ-T载体是高效、便利的PCR产物克隆专用载体。该载体是基于pBlueScript II SK(+) 质粒，在EcoRI识别位点处添加了适当序列，经酶切处理后获得具有突出的3’-端T碱基的线性载体。EZ-T载体可与Taq 或Tth 等DNA聚合酶催化的携带3’-端A碱基的PCR产物互补连接，以利于下一步克隆或测序。由Pfu、Pwo、Vent或KOD等高保真DNA聚合酶催化反应的PCR产物，也可经Taq DNA聚合酶添加3’-端A碱基后，与EZ-T载体连接。
EZ-T载体多克隆位点区插入位点两侧均设计了EcoRI酶切位点，因此既可使用EcoRI单酶切，也可使用其他适当的内切酶双酶切，释放插入片段进行检测或亚克隆。EZ-T载体不含NdeI或NcoI限制性内切酶位点，故可用于克隆含上述酶切位点的基因。DNA测序建议使用M13 Forward和M13 Reverse或T7 promoter和T3 promoter 通用型引物。

用途

·  PCR产物测序和亚克隆
·  利用lac promoter进行基因表达

特点

• 阳性率高：高纯度酶切型线性T载体，重组效率更高，蓝斑率低于10%
• 方便灵活：可于4℃运输；可与任何品牌T4DNA连接酶配合使用
• EZ-T™载体含多个常用酶切位点，利于无适当酶切位点DNA片段的亚克隆
• 插入对照：提供纯化的PCR片段作为阳性对照
• 无NdeI或NcoI位点，利于重组表达基因的亚克隆
• 蓝白筛选：高表达活性的b-半乳糖苷酶，显色更快更深
• 批次稳定：遵循标准化生产流程，经过严格的质量检测

产品组分

EZ-TTM Cloning Vector（40 ng/μl）	20 μl
Control Insert（40 ng/μl）	5 μl

保存条件

−20℃保存一年，避免反复冻融，单次用量少时应适量分装

质量控制

使用GenStar T4 DNA连接酶进行连接时，当插入DNA对照(800 bp)与载体的摩尔比例为3:1时，蓝斑率低于5%，有90%以上的白色菌落含插入DNA对照片段。经测序确认多克隆酶切位点及T碱基存在。