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文献和实验CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具,今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作,仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒,如下图所示: 酶切系统 37 ℃, 3 hr;Run 1% gel,回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端,以利于下游 oligo 退火产物的连接;酶切时请充分,且绝对不能加 CIP 处理
Science:性经验如何引起大脑内部状态改变?李莹课题组发现关键神经环路
发现,与无性经验和交配能力恢复的小鼠相比,处于性饱足状态小鼠具有更多 BNSTEsr2 神经元表现出更高兴奋性。进一步研究发现,处于性饱足状态下的雄性小鼠 BNSTEsr2 神经元会表达更多 Hcn1 通道,而该现象在雌性小鼠中并不显著。使用 CRISPR/Cas9 技术在 BNSTEsr2 神经元选择性敲除 Hcn1 基因,雄性小鼠表现出明显的性饱足状态缺失 (图 3)。 图 3. CRISPR/Cas9 介导 BNSTprEsr2 神经元中 Hcn1 敲除后,雄性小鼠能够持续交配。 综上所述
formation by upregulating Osterix in osteoblasts③ 2018年度全球十大测序公司近日,GEN网站就列出了2018年度全球十大测序公司。Illumina以33.33亿美元的收入高居榜首,而赛默飞世尔科技和华大基因分列二三位。五年前,人类基因组测序的费用首次降至1,000美元。然而,这并不是终点。专业人士预测,在未来三到五年内,基因组测序的费用有望降至99美元。测序费用的大幅下降离不开多家测序公司的努力和竞争。近日,GEN网站就列出了2018年度全球十大测序
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