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文献和实验):819–823. doi: 10.1126/science. 1231143 20. Mali P, Yang L, Esvelt KM, Aach J, Guell M,DiCarlo JE, Norville JE, Church GM (2013)RNA-guided human genome engineering via Cas9. Science 339(6121):823–826. doi: 10. 1126/science.1232033 21. Jinek M
胞的分化进程还并不完全清楚。近年来，随着计算生物学的发展特别是单细胞组学的迅猛发展，科学家有机会通过综合数学和统计模型并结合组学数据来研究细胞命运的发展。造血干细胞是研究细胞命运选择的经典模型，在脊椎动物的骨髓里，有限的造血干细胞可以分化出体内各类成熟的血细胞，这个作用受到转录因子和DNA元件严密的平衡调控。尽管此前的研究通过测量RNA的表达量来量化不同子细胞中的转录因子的变化，但大家都知道，RNA的表达量并不等于蛋白质的表达水平。目前，来自牛津大学Weatherall研究所计算生物学中心
gRNA 设计是整个 CRISPR 实验里性价比最高的一步——花一小时把序列挑对，能省下后面四周的返工。但也有个误区：很多人把设计理解成"打开网站、输基因名、复制第一条序列"。 先说结论：gRNA 设计的核心是选对靶外显子和切割位置，而不是单纯看软件打出的脱靶分数。一条高分 gRNA 如果切在最后一个外显子、或者切在只有部分转录本共有的外显子上，编辑效率再高也拿不到真正的敲除。设计流程应该是：确定编辑目的 → 选择靶区域 → 生成候选序列 → 过滤序列层面的禁忌 → 评估脱靶 → 至少保留
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