- ￥10
- 一基
- 上海
- YJ-562356
- 2025年07月14日
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RT(常温）
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100
- 供应商：
上海一基实业有限公司
- CAS号：
562-35-6
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文献和实验技术、TALEN技术和CRISPR/Cas9技术的基因敲除研究。 实验流程1. 基因组DNA的准备：提取野生型和突变型细胞的基因组DNA。Genloci公司专为阳性克隆筛选设计的TNA抽提试剂盒也能帮您的忙，只需500个左右的细胞即可提取全基因组DNA。 2. 杂交DNA的准备：a) PCR引物设计：一般扩增产物长度为300~600 bpb) PCR扩增：获得杂交DNA 3. Cruiser™酶筛选阳性克隆：无需纯化DNA，直接使用PCR产物，混合体系后45℃下反应15~20 min K562
技术、TALEN技术和CRISPR/Cas9技术的基因敲除研究。实验流程1. 基因组DNA的准备：提取野生型和突变型细胞的基因组DNA。Genloci公司专为阳性克隆筛选设计的TNA抽提试剂盒也能帮您的忙，只需500个左右的细胞即可提取全基因组DNA。2. 杂交DNA的准备：a) PCR引物设计：一般扩增产物长度为300~600 bp b) PCR扩增：获得杂交DNA3. CruiserTM酶筛选阳性克隆：无需纯化DNA，直接使用PCR产物，混合体系后45℃下反应15~20 minK562细胞
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后，相应的测序信号都出现了极大的降低。这些结果都表明了 CBE 脱靶效应的存在。 作者对脱靶现象进行了进一步细分，发现这些脱靶现象发生的靶点可以被分为 Cas9 依赖性以及 Cas9 非依赖型。 图片来源：Nature Method 为了验证 Detect-seq 的可靠性，作用将 Detect-seq 与此前被用来研究 Cas9 依赖型脱靶效应的工具进行了对比。与 GUIDE-seq 相比，Detect-seq 识别出了大部分 GUIDE-seq 在 EMX1 与 VEGFA_site_2 中识别
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