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上海一基实业有限公司
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27176-10-9
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文献和实验2、基因编辑(Gene Editing) 原理:Cas9 蛋白在 sgRNA 的引导下切断目的基因 DNA 列,导致移码突变、 碱基突变、基因片段敲入等 应用场景:隐性、显性单基因疾病,基因功能缺陷引起的疾病等 应用案例精选 病毒工具:AAVshH10-SpCas9,AAV shH10-sgRNA 作用效果:敲除 Car2 基因 注射方式:DBA/2J 小鼠,玻璃体内注射,1x1013 gc/mL. 2uL 检测时间: 感染后 1 周
分为五步,即gRNA文库选择、gRNA文库扩增、gRNA文库慢病毒包装、gRNA文库筛选、PCR扩增和NGS测序 1、gRNA文库选择 首先客户选择所需gRNA文库。如果客户根据具体需要提出文库定制(小于300个基因),我们将根据客户提供的基因群信息进行单个基因的gRNA设计,保证每个基因设计3个不同的gRNA,最大程度确保基因功能的突变。我们采用的载体是单/双慢病毒载体,单慢病毒载体是一个载体上同时携带单个gRNA和cas9基因,双慢病毒载体是一个载体上只有单个gRNA,cas9蛋白则由单独
。但确定这些lncRNA的功能和机制仍具有挑战性。作者开发了基于全基因组规模的CRISPR-Cas9激活筛选系统,可以靶向超过10,000个lncRNA转录起始位点,用于识别影响感兴趣表型的lncRNA 。通过此技术发现有11个lncRNAs在募集活化因子后介导人类黑素瘤细胞BRAF抑制剂的抗性。 点评:从组学高通量筛选到功能高通量筛选的标杆文章 3. 案例-单细胞核测序 期刊:Nat Commun (IF=12.124) See K, et al. Single
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