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信帆生物
产品简介:
硝态氮是植物最主要的氮源,植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况,可作为土壤氮肥的指标,测定植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。硝态氮检测试剂盒(磺胺微板法)检测原理是还原剂将硝酸根还原成亚硝酸根后,与对氨-基-苯-磺酸和萘胺结合,形成玫瑰红色的偶氮化合物,其颜色深浅与氮含量在一定范围内呈正比,以酶标仪测定 520nm 处吸光度,根据硝态氮的标准曲线即可计算出样品的硝态氮含量,主要用于测定植物组织、血清、组织样本等的硝态氮含量。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考):
1、准备样品:
①植物样品:取正常或逆境下的新鲜植物组织 0.1~0.15g,清洗干净,擦干,剪碎成
1~2mm 的碎片,加入 4ml 硝态氮提取液,剧烈振荡 2~4min,静置澄清后,上清液即
为硝态氮提取液,4℃保存备用。
②血清和尿液样品:按照常规方法制备后可以直接用于该试剂盒的测定,4℃保存,用于
硝态氮的检测。
③高活性样品:如果样品中含有较高浓度的硝态氮,可以使用硝态氮提取液或蒸馏水进
行恰当的稀释。
- 配制系列硝态氮标准溶液:取硝态氮标准(200μg/ml)用蒸馏水稀释至 20μg/ml。
产生气泡。如果样品中的硝态氮浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置平行管。
4、硝态氮测定:剧烈振荡 1min,静置 10min,用双层滤纸过滤至新的离心管中,4000rpm
离心 5min,取上清液再次离心,取上清液加入 96 孔板中,以蒸馏水做对照调零,酶标
仪 520nm 处测定标准孔、测定孔吸光度(记为 A 标准、A 测定)。
计算:
以系列硝态氮标准(1~7 号管)浓度(μg/ml)为横坐标,以对应的吸光度为纵坐标,制作标准曲线,根据测定孔的吸光-度计算出样品硝态氮的含量。根据如下公式计算具体样品中硝态氮的含量:
植物组织样品硝态氮(μg/g)=C×V/m
式中:C=从标准曲线上查得的样品的硝态氮浓度(μg/ml)
V=样品提取液的总体积(ml),本法中为 4ml
m=样品的质量(g)
血清、尿液等样品硝态氮(μg/ml)=C×N
式中:C=从标准曲线上查得的样品的硝态氮浓度(μg/ml)
N=稀释倍数
注意事项:
1、 实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即测定,应存于 4℃。
2、 Assay Buffer 易挥发,请密闭保存。
3、 如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定。
4、 所测样品的浓度过高时,应用硝态氮提取液或蒸馏水稀释样品后重新测定。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12 个月有效。
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文献和实验磺胺药物是重要的广适性的抗生(抗菌)药物。它们都含有对氨基苯磺酰胺基团,故称为磺胺类药物。它不仅能局部外用,而且可内服,预防和治疗局部和全身细菌感染,如肺炎、脑膜炎、败血症等。目前常用的磺胺药有磺胺嘧啶( SD ) 和磺胺甲基异噁唑( SMZ ) 。若分子中酰胺基的一个氢被甲氧吡嗪 基团取代便成为长效磺胺。若被 5 , 6- 二甲氧基嘧啶 取代,其药效可增长至 150h (半衰期)。人们还发现了若把广谱增效剂——甲氧苄氨嘧啶( TMP )与磺胺
一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
又称对氨基苯磺酰胺。一般凡属于该物质的酰胺取代物的均称作磺胺药物,或磺胺制剂。对肺炎、化脓性疾病、淋病等以至链球菌、葡萄球菌等细菌性感染的疾病均有效。 G. Domagk( 1935)发现,一种偶氮色素百浪多息(偶氮磺胺)对于感染了葡萄球菌的鼷鼠有显著的效果,这是发现磺胺药物的开始。以后,法国的 J. Trefonl发现偶氮磺胺之所以有效是由于它在体内被还原生成对氨基苯磺酰胺所致。 F. LiP- mann( 1945)发现,对氨基苯磺酰胺乙酰移换酶促使磺胺乙酰化生成乙酰磺胺时必需要含有
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