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文献和实验同pUC18 载体相同的功能。此外,本制品中的高效连接液Ligation Mix可以在极短时间内(约5分钟)完成连接反应,且此连接液可以直接用于细菌转化,大大方便了实验操作。 转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导入细菌的过程。当细菌处于CaCl2低渗液中,细菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42℃短时间热击处理,促进细胞吸收DNA复合物。将细菌放置在非选择性培养基中保温一段时间,促使在转化过程中获得的新的表型(如抗Ampr
的问题。80年代末、90年代初发展起来的一种快速获取cDNA全长的方法,即RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends),目前这个方法被广泛用于克隆各种未报道的基因,该方法基于PCR技术,步骤少,耗时短,且经济节省,只需知道mRNA内部很短的一段序列或一小段cDNA(如EST)即可用此法克隆出未知的序列。目前,RACE已经不局限在克隆cDNA上,在克隆cDNA相邻序列以及基因组片段等方面也得到越来越广泛的应用。RACE技术使传统筛库的方法寻找全长基因的过程从几个月,缩短
相关专题 Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以与有HIs(组蛋白)标签的碱性蛋白蛋白结合,组蛋白标签一般是6个组氨酸(碱性氨基酸)。在蛋白上样后,带有组氨酸标签的蛋白特异性结合到柱子里,其他的杂蛋白流出。Ni-NTA纯化介质是Ni离子金属螯合介质。 蛋白过镍柱纯化的原理:Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以与有HIs(组蛋白)标签的碱性蛋白蛋白结合,组蛋白标签一般是6个组氨酸(碱性氨基酸)。在蛋白上样后,带有组氨酸标签的蛋白特异
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