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- ATCC
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- 2025年07月09日
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![M15[pREP4]感受态细胞](https://img1.dxycdn.com/2017/0821/720/3228302511078734646-14.jpg!wh200)
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
1年
- 英文名：
BL21-Gold (DE3)
- 库存：
20
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
500ul甘油菌
基本信息
| 出品公司: | ATCC |
|---|---|
| 菌株类型: | E.coli |
| 培养基: | LB培养基 |
| 生长条件: | 37 ℃, 有氧 |
| 基因型: |  |
| 抗性: | 四环素 |
| 质粒转化条件: | 42 ℃热激 |
| 应用: | 可以同时用作蛋白表达菌株和质粒克隆菌株 |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| AT1008 | BL21-Gold (DE3) | 500ul甘油菌 |
¥1000.00 |
菌株特点
BL21-Gold(DE3)是BL21系列细胞的升级版，提升了转化效率并且能够产生高质量的小提DNA。
BL21-Gold(DE3)是利用T7 RNA聚合酶启动进行蛋白表达的载体的高效表达菌株。本宿主菌来源于E.coli B，缺乏Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，能够有效防止目标蛋白降解。
BL21-Gold(DE3)感受态细胞具有Hte表型，该表型增加了细胞的质粒转染效率。另外，菌株内的endonuclease I (endA)编码基因被失活了，而该蛋白酶(endA)能够在大部分的质粒小提时，快速降解质粒DNA。这两个菌株明显特征，使得该菌株能够直接用来扩增克隆蛋白表达构建质粒。
由于在未使用IPTG进行诱导表达时，宿主菌内仍然有少量T7 聚合酶合成，这能够导致少量的目的蛋白合成。如果目的蛋白是毒性蛋白的话，会抑制细菌生长，甚至导致细菌死亡。所以本菌株不适合表达对细菌有毒性或生长抑制的蛋白。
1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。
3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
特别注意事项：
l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时与我司销售联系或更换新的菌种。
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文献和实验(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1 2：BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3
【交流】转载：JM109，DH5a，BL21这些感受态有何区别
1：DH5a菌株 DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。 基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1 2：BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动
(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1 2：BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3
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