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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
1年
- 英文名:
M15(pREP4)
- 库存:
18
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
300ul/株
产品信息:
| 货号 | 名称 | 产品形式 | 规格 | 储存 |
| A0027 | M15(pREP4) Strain | 甘油菌 | 300μl | -20℃ |
使用说明:
康朗质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后,请及时在固体平板上划线培养,挑取单菌落接种到液体培养基中,震荡培养后使用并保存甘油菌。如需获取其他详细信息请登录我司官网联系QQ客服查询。
基因型:
M15[pREP4]genotype:derived from a strain K12, Nals strs rifs thi- lac- ara- gal+ mtl- F- recA+ uvr+ ion+ [pREP4 KanR], resistance: kanamycin, source: Qiagen
基本信息:
抗性:Kan
培养基:LB
菌株类别:大肠杆菌
培养条件:37℃,有氧,LB
质粒转化:42℃热激
保存方式:20%甘油,-20℃
基本应用:pQE系列载体的蛋白表达
备注:IPTG诱导表达
菌株简介:
M15菌株细胞含有包含反式lac 抑制子的pREP4质粒,保证高度调控的表达。M15[pREP4]菌株携带有阻抑质粒pREP4,该质粒高水平的表达lac抑制子,在IPTG诱导前反式抑制蛋白表达. 通过卡那霉素抗性筛选可以保持pREP4质粒在菌株中的稳定性。对M15使用LB,在37℃有氧的环境下培养,42℃热激处理可将质粒成功转入M15中,通常的情况下,使用IPTG可使菌株进行高效的蛋白表达。
注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。
2、使用甘油菌时可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可,也可完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。
菌种培养及打管说明:
1、安瓿瓶开封:用浸过75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基,滴入安瓿管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液,移植于1-2支建议的培养基试管中,并在建议的条件下培养。
3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在6-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
特别注意事项:
l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时与我司销售联系或更换新的菌种。
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文献和实验之前已分别构筑出GUS 基因的表现质体pQG11,若要令启动子T5promotor 的启动受到更好的调控,应进一步将pQG11 转形至大肠杆菌M15[pREP4]. M15[pREP4] 可持续表现lac repressor,pQG11 上用以驱动GUS基因表现的T5 promoter 的活性将因而受到抑制,但一旦加入IPTG 就能诱导GUS基因大量表现。 在这一节的实验里,我们将分别自经IPTG 诱导与未经诱导的pQG11/M15[pREP4] 菌体抽取total RNA,以便以北方杂合反应
大肠杆菌的基因型 甲基化相关的基因型 dam (DNA adenine methylase) Map position: 74 min 功能:dam基因表达DNA腺嘌呤甲基化酶,它能催化特异序列GATC中A的甲基化,保证DNA免受限制性核酸内切酶Mbo I的切断,同时在DNA复制时也起一定的辅助作用。dam基因的变异导致腺嘌呤(A)甲基化酶活性的缺失,使腺嘌呤 (A) 不被甲基化,易于获得非甲基化质粒。 dcm (DNA cytosine methylase) Map
刚刚看到的,基本上各种常见的和不常见的大肠杆菌表型在下面都可以查到,内容不是我写的,想成为分子生物学高手的网友应该好好研究一下。其内容来自:http://openwetware.org/wiki/E._coli_genotypes F- = Does not carry the F plasmid F+ = Carries the F plasmid. The cell is able to mate with F- through conjugation. F
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