北京细菌蛋白提取试剂盒价格

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名称：北京细菌蛋白提取试剂盒价格
英文名：Bacterial protein extraction kit
产地：国产|进口
规格：100次
细菌蛋白提取试剂盒使用温和的非离子型去污剂，适用于大肠杆菌表达的重组蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎等复杂的操作步骤，有效避免了外源蛋白的污染。该试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制剂混合物，可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象，有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性，可进行IP、Western blot实验，也可直接通过Ni-NTA 等纯化填料进行蛋白纯化。该试剂盒既可适用于小量蛋白表达检测，也适用于大量蛋白的表达纯化试验；既适用于纯化可溶型蛋白，也适用于纯化包涵体蛋白。每次提取使用1ml 缓冲液计算，该试剂盒可以使用100次。

试剂盒组成：

 

组份	规格	贮存
细菌蛋白提取缓冲液	100 ml	常温
蛋白酶抑制剂(100×)	1 ml	-20℃
溶菌酶 50mg/ml	1 ml	-20℃
DNase I	1000 U	-20℃

使用方法：
一、可溶型蛋白操作方法(1 ml菌液为例)
1、8000rpm常温离心 3min 后，弃上层培养基，留取管底部菌体(尽量弃除掉培养基) 。
2、加入 200μl细菌蛋白提取液，2μl DNase I和4μl 溶菌酶重悬菌体，用吸头吹打至无可见细胞团块。
3、置于常温孵育 10-15min，期间轻弹离心管数次以加速裂解。
4、裂解完成后 13,000rpm 于4℃离心5 min，将上清转移至新的容器中，溶液可直接进行下一步纯化或检测试验。

二、包涵体蛋白操作方法(1 ml菌液为例)
1、上述步骤4 中，弃上清，保留沉淀组分，用200μl 的细菌蛋白提取液重悬沉淀。
2、加入4μl溶菌酶，混合均匀，常温孵育 10-15 min。
3、加入 800μl 的灭菌水混合均匀。
4、13,000 rpm常温离心5min，弃上清后用 900μl 灭菌水重悬沉淀，然后加入 200μl 细菌蛋白提取液，混合均匀。
5、13,000rpm 室温离心5 min，重复步骤4 三至五次。
6、将沉淀溶解于变性溶液中，进行下一步纯化或复性试验。

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·考马斯亮蓝快速染色液
编号：RFT054
英文名称：Commassie Blue Fast Staining Solution
规格：500ml
本考马斯亮蓝快速染色液是以考马斯亮蓝G-250为主要成分，采用新配方配置而成。可用于SDS-PAGE或非变性PAGE胶(native gel)的快速染色。由于配方中不含甲醇、乙酸等物质，因此在整个染色过程中清洁、安全，并且用水即可脱色。整个染色脱色过程只需30分钟左右即可得到清晰可见的结果，灵敏度高，可见10ng蛋白带。

用前必读：
1、使用前如发现瓶中有少许沉淀，请混匀后使用。
2、以下“使用方法”是针对0.75mm厚度，10×10cm凝胶染色程序。

使用方法：
1、漂洗：
将电泳后的PAGE胶取下放入微波炉专用塑料容器中，加入适量超纯水(以刚刚覆盖过胶面为适)，微波炉中高火(700-800瓦)加热，至溶液沸腾后继续煮沸1-2分钟；取出容器均匀摇动数下；重复上述步骤2-3次；弃尽水溶液。
2、染色：
加入适量染色液(用量根据凝胶面积的大小及容器大小而定，以浸没胶面为准)，放入微波炉中高火(700-800瓦)加热，溶液沸腾后继续煮沸1-2分钟；取出容器均匀摇动数下；重复上述步骤数次，直至蛋白条带清晰可见时即可停止加热；弃去染色液(收集到备用容器中，可以反复利用1-2次)。
注：
a.此步骤是染色的关键步骤，染色停止的标准是-条带清晰可见。如由于挥发导致染色液减少，可适当补加染色液。
b.如使用1.0mm或更厚的凝胶，染色煮沸时间会相应延长。
3、脱色：
加入适量超纯水(以刚刚覆盖过胶面为适)，放入微波炉中高火(700-800瓦)加热，至溶液沸腾后继续煮沸1-2分钟；取出容器均匀摇动数下；重复上述步骤1-2次，此时PAGE胶的蓝色背景应已去除。
4、保存：
弃去水溶液，加入适量超纯水，观察和保存染色结果。

注意事项：
1、使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm，厚度0.75mm的凝胶，如果使用更大面积或更厚的凝胶，请加入更多的染色液并延长各步骤的时间。
2、对于SDS-PAGE胶，步骤1的漂洗非常重要，因为残余的SDS会严重影响后续的染色；而对于不含SDS的非变性胶的染色，可以省略步骤1。
3、本染色液可以重复利用1-2次，敏感性没有明显下降。
4、本染色液有轻微腐蚀性，请带手套操作。

储存条件：室温，有效期2年。


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4-**甲*(代"酸") lactitol 586-76-5
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硫堇 Kallikrein from porcine pancreas 581-64-*(代"6")
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