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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Pig kil3 pasteure0l9 (SPA) nu9lei7 0cid detection agent (PCR)
- 库存:
18
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
盒
猪多杀性巴氏杆菌(SPA)核酸检测试剂盒(PCR法)反应需注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
特点优势:
1. 特异性:
2. 重现性:
3. 灵敏性:
4. 实用性:
猪多杀性巴氏杆菌(SPA)核酸检测试剂盒(PCR法)性能指标:
1. 试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
猪多杀性巴氏杆菌(SPA)核酸检测试剂盒(PCR法)反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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禽流感病毒H5亚型PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
禽流感病毒H7亚型PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
禽流感病毒H9亚型PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
禽流感病毒PCR检测试剂盒 50T/100T 保存:-20 ℃, 保质期一年。
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文献和实验阻断调理素与吞噬细胞作用的结果。 3 .固定补体 SPA - IgG 和免疫复合物一样可以固定人和某些动物 ( 如豚鼠、猪、狗等 ) 血清中的补体,主要是通过补体传统激活途径。 4 .促有丝分裂因子 SPA 是一种 B 细胞激活剂,固相 SPA 作用明显,并不需要 T 细胞辅助 , 可容性 SPA 作用微弱,必须有 T 细胞参与。 5 .去封闭作用 固相 SPA 能部分去除肿瘤病人和带瘤动物血清中的封闭活性,从而降低
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。 1、仪器设备 超净工作台、PCR仪、电泳仪、凝胶成像分析系统、台式离心机、旋涡混悬器等。 2、实验试剂 选用美国Stratagene公司生产的支原体检测试剂盒(内有引物、阳性
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