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粘附性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法

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  • ¥990 - 2580
  • KALANG
  • 中国/上海
  • KL11-1049
  • 2025年07月15日
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    • 保存条件

      -20℃

    • 保质期

      12个月

    • 英文名

      Adhesion e. coli (EAEC) nucleic acid test kit (pcr-fluorescence probe method)

    • 库存

      18

    • 供应商

      上海康朗生物科技有限公司

    • 规格

    产品细节图片1
    粘附性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)反应需注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
    特点优势:
    1. 特异性:
    2. 重现性:
    3. 灵敏性:
    4. 实用性:
    粘附性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)性能指标:
    1. 试剂盒检测特异性为100%
    2. 检测试剂盒重现性为100%
    3. 灵敏度可达到103/ml
    4. 有效期为6个月
    粘附性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
    引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
    ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
    ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
    ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
    ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
    ⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
    ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
    ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
    引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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