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吉玛全程服务(细胞、双荧光、cas9)

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  • 2026年01月01日
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    服务流程:

    microRNA靶基因荧光素酶报告载体

    吉玛采用Promegapsicheck2.0的载体系统完成靶基因3’ UTR质粒载体构建服务。可提供基于人、小鼠、大鼠基因的UTR构建。

    psicheck2.0报告基因检测系统用来检测siRNA/miRNA与靶基因是否可能存在调控作用,该报告系统报告荧光(hRluc),其下游构建了靶基因3’UTR区域,通过对该荧光的监测,即可验证siRNA/miRNA对该靶标是否有调控作用;另有一校正荧光(hluc) 作为稳定内参,用于监测质粒表达效率。

    严格的实验体系,要求miRNAmRNA 3’ UTR验证实验中需要构建靶mRNA的点突变载体,以验证靶点作用有效性。突变载体构建主要依据预测的miRNA与靶基因3’UTR的稳定结合区域(即种子区)。通过种子区全部碱基或部分碱基突变导致miRNA与靶基因3’UTR区域的结合能力大大降低,从而判断是否存在miRNA的调控作用。

    完成miRNA靶基因报告基因载体构建,需要客户提供:miRNA具体信息,预测靶基因信息,miRNA与靶mRNA结合位点信息。

    套餐搭配 促销价格 周期
    A-1结合靶点预测和UTR序列载体构建 2200元 10-15个工作日
    A-2结合靶点预测和UTR序列载体构建+突变体构建 4000元 15-20个工作日
    B-1干扰序列/mimics(2OD)+UTR序列载体构建 2500元 10-15个工作日
    B-2干扰序列/mimics(2OD)+UTR序列载体构建+突变体构建 4300元 10-15个工作日
    C-1干扰序列/mimics(2OD)+UTR序列载体构建+验证服务 8000元 10-25个工作日
    C-2干扰序列/mimics(2OD)+UTR序列载体构建+突变体构建+验证服务 10000元 10-25个工作日


    注:

    a. 靶基因3’ UTR长度须小于500bp,否则价格及合成周期另计;

    b. 单位点(1miRNA-mRNA作用位点) 突变价格如上,多位点突变价格及合成周期另计。



    除以上服务,吉玛还提供以下服务:

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    相关实验
    • 大家好,我是一条佛系的 lncRNA

      精确打击。如今科学家们根据此原理设计了 CRISPR/Cas9 技术进行基因编辑,在目标基因的上下游各设计一条向导 RNA,将其与含有 Cas9 蛋白编码基因的质粒一同转入细胞中,向导 RNA 可以通过碱基互补配对靶向目标序列,待编辑的细胞基因组 DNA 被看做外源 DNA,Cas9 蛋白使得该基因上下游的 DNA 双链断裂,从而实现目标基因的敲除。这项技术即提高了敲除的准确性,又大大缩短了研究者的时间。可谓是省时又省力。这么高大上的技术应用于我身上,够我吹牛一辈子了。得到了我的过表达与敲除表型

    • 基因组编辑技术应用于作物遗传改良的进展(上篇)

      -guidedengineerednuclease) 核糖核蛋白 (RGENribonucleoproteins,RGENRNPs) 编辑系统。瞬时表达 CRISPR/Cas9 编辑系统的操作流程和原理是:将 CRISPR/Cas9 质粒 DNA(TECCDNA) 或其转录的 RNA(TECCRNA) 通过基因枪法直接转入植物愈伤组织,因是环状质粒或 RNA,故不易被整合进植物基因组中;在完成切割使命后,质粒 DNA 或 RNA 会被细胞内源核酸酶分解,从而实现全程 DNA-free 的基因组编辑。研究人员对该系统在小麦基因组中的定向修饰特性

    • 非编码RNA研究及实验

      对lncRNA设计干扰片段,再将该片段构建入病毒载体中。该载体除了可以直接瞬时转染细胞用于lncRNA的干扰,也可以包装成慢病毒,用于动物水平干扰lncRNA。 lncRNA敲除:用CRISPR/Cas9技术对lncRNA进行敲除。针对lncRNA某条片段的两端分别设计多条sgRNA序列,实现大片段删除,从而达到敲除的效果。将sgRNA序列构建入病毒载体中,再将Cas9序列装入另一载体中,随后两种病毒同时感染目的细胞进行敲除。 lncRNA靶基因寻找:方法基本类似于上面表述的miRNA双荧光

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