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文献和实验的因素、树脂的预处理及再生方法、溶剂残留等方面对大孔吸附树脂进行了评述,以期为大孔吸附树脂在中药有效成分分离中的应用提供参考。 1 大孔树脂的性质及分离原理 大孔吸附树脂主要以苯乙烯、а-甲基苯乙烯、甲基丙烯酸甲酯、丙腈等为原料加入一定量致孔剂二乙烯苯聚合而成,多为球状颗粒,直径一般在0.3~1.25mm之间,通常分为非极性、弱极性和中极性,在溶剂中可溶胀,室温下对稀酸、稀碱稳定。从显微结构上看,大孔吸附树脂包含有许多具有微观小球的网状孔穴结构,颗粒的总表面积很大
,可暂时放于超低温冰箱保存。 Thermo Scientific Revco超低温冰箱具有2台1HP工业级压缩机,高效的制冷能力;双风扇设计散热能力快,环境耐受32℃高温不报警;钥匙锁孔开关,保证样品的安全可靠;以及内门、门锁等人性化设计。Revco超低温冰箱70年的历史打造专业和品质,不愧为世界一流品牌。 图 3 Thermo Scientific Revco超低温冰箱 六、恒温水浴 从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温
与靶细胞DNA序列自然发生同源重组的机率非常低,约为百万分之一,要把基因敲除成功的细胞筛选出来是一件非常困难的工作. 因此,同源重组的筛选和检测就成了基因敲除技术所要解决的关键问题. 目前已有多种筛选方法,其中1988年犹他大学的Capecchi et al教授的研究组发展的"正负双向选择系统"适用范围宽且效率较高. ES细胞基因敲除途径建立转基因小鼠技术的成熟,首次使体外精细的基因操作与小鼠的整个生长发育和生命过程得到了直接的结合,为探讨高等动物基因组结构和功能提供了有效的方法. 由基因敲除技术产生
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