T7 RNA 聚合酶

T7 RNA 聚合酶

规格：25KU|5KU
特性:
制备放射标记的 RNA 探针
合成用于体外翻译的 RNA
合成用于结构、加工和催化性能研究的 RNA
合成 RNA 反义链，调控基因表达
概述:
T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。已开发出多种载体，可将目的基因序列克隆到 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中，以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。用 T7 和 SP6 RNA 聚合酶合成的 RNA 具有 mRNA 的生物特性，可进行准确剪切。实验证实，将克隆的 DNA 序列反向而产生的 RNA 反义链能特异性地阻断体内 mRNA 的翻译。由于 RNA/DNA 杂交体比 RNA/RNA 和 DNA/DNA 杂交体更稳定，因此核酸杂交反应中的检测信号会更强。
来源:
SP6 RNA 聚合酶来自重组 E. coli 菌株，该菌株携带克隆于 Salmonella typhimurium LT2Z 的 SP6 RNA 聚合酶基因。T7 RNA 聚合酶来自重组 E.coli BL21 菌株，该菌株携带可表达 T7 基因 I 的 pAR1219 载体。T3 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株，该菌株携带可表达 T3 基因载体。
反应条件:
1X RNAPol 反应缓冲液
[40 mM Tris-HCl (pH 7.9)，6 mM MgCl2，2 mM 亚精胺，10 mM DTT］。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP（不随酶提供）和带有启动子的模板 DNA，分别在 37℃（T3 RNA 聚合酶和 T7 RNA 聚合酶）或 40℃（SP6 RNA 聚合酶）温育。
质保声明:
无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。
单位定义:
1 单位指在 37℃（T3 RNA 聚合酶）（T7 RNA 聚合酶）或 40℃ 条件下（SP6 RNA 聚合酶），1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。
浓度:
T3 RNA 聚合酶:50,000 units/ml；T7 RNA 聚合酶:50,000 units/ml；SP6 RNA 聚合酶:20,000 units/ml。