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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pUC119-gRNA
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5μg
pUC119-gRNA
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ1082 | pUC119-gRNA | 20μl |
¥680 |
使用说明
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文献和实验分为五步,即gRNA文库选择、gRNA文库扩增、gRNA文库慢病毒包装、gRNA文库筛选、PCR扩增和NGS测序 1、gRNA文库选择 首先客户选择所需gRNA文库。如果客户根据具体需要提出文库定制(小于300个基因),我们将根据客户提供的基因群信息进行单个基因的gRNA设计,保证每个基因设计3个不同的gRNA,最大程度确保基因功能的突变。我们采用的载体是单/双慢病毒载体,单慢病毒载体是一个载体上同时携带单个gRNA和cas9基因,双慢病毒载体是一个载体上只有单个gRNA,cas9蛋白则由单独
μM)5μlNaCl 100 mM(终浓度)Tris‐Cl pH7.4 50 mM(终浓度)加水补足 50 μl将配制好的退火反应缓冲液重复混合,短暂离心后放置 PCR 仪上,运行以下程序: 90℃ 4 min, 70℃ 10 min, 55℃ 10 min, 40℃ 10 min, 25℃ 10 min。退火后的寡核苷酸可以立刻使用或者在 ‐20℃ 长期保存。三、 pCas9/gRNA 基因敲除载体的构建用 EcoRV 酶切 2 μg pCas9/gRNA 载体(inovogen)。通常
靶向神经元的血清型⸺AAV-EP+ 神经元作为中枢神经系统的核心功能单元,负责信息处理、传递和存储,是维持认知、运动和感觉功能的基础。随着阿尔茨海默 病、帕金森病、亨廷顿病等神经退行性疾病发病率的不断上升,神经元已成为基因治疗领域的重要靶点。然而,针对大脑神经元 的基因递送面临着独特的挑战:血脑屏障的严密保护、神经元亚型的高度异质性、以及对外源载体的敏感性都限制了传统基因 治疗载体的应用效果。传统 AAV 血清型在跨越血脑屏障和实现神经元特异性转导方面存在效率低、脱靶效应明显等问题。 2025 年 5 月
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