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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pHIV-H2BmRFP
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5μg
pHIV-H2BmRFP
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0675 | pHIV-H2BmRFP | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | EF-1α ,CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC ori |
| 质粒分类: | 病毒系列,慢病毒克隆载体 |
| 质粒大小: | 8045bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | Stbl3 |
| 培养条件: | 37℃,有氧 LB |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导,瞬时表达 |
| 5'测序引物: | CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验在体外将两个或多个来源相同或不相同的 DNA 片段连接成新的重组 DNA 分子,再转到特定宿主细胞中进行自主复制并表达。这是分子生物学中的基本技术。DNA 重组技术的基本程序包括:(1)获得外源 DNA:外源 DNA 是进行 DNA 重组的目的 DNA 片段,一般采用 DNA 聚合酶链式反应 (PCR) 或逆转录-DNA 聚合酶链式反应 (RT-PCR)、基因组文库或 cDNA 文库筛选等方法获得。(2)载体的构建或选择:分子生物学中用的载体是指能在特定宿主细胞中自主复制的 DNA 分子
处(包括双链 DNA 断裂位点)的募集过程。采集的图像不仅帮助我们确定募集到断裂位点修复蛋白的动力学信息和聚集水平,还验证了内源转录调节因子和 DDR 通路因子在 DNA 断裂位点的共定位。 图 1:实验方案示意图 将 MRE11 cDNA 克隆到带有 GFP 标签的表达载体中,然后将其转染到 U2OS 细胞。在使用溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)或 Hoechst 进行标记后,使用 FV3000 共聚焦显微镜的 405 nm 激光对核内目标区域(ROI)进行线扫描诱导 DNA 损伤。随后使用
体系 37度3小时 4ul pCDNA3.1载体(500 ng/ul) 1ul BamHI 1ul EcoRI 2ul 10×buffer 12 ul H2O 酶切完成后胶回收(见附录) 处理好的目的片段与载体连接反应体系: 6ul PCR 酶切回收片段(约50ng/ul) 1ul 酶切好的载体(约50ng/ul) 2ul ligase buffer 1ul T4ligase 10ul H2O 以上连接液在16℃过夜。 转化 (感受态细胞: DH5a),具体步骤见
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